[发明专利]慢病毒感染试剂及其制备方法与应用有效

专利信息
申请号: 201810935831.6 申请日: 2018-08-16
公开(公告)号: CN109055432B 公开(公告)日: 2020-10-13
发明(设计)人: 傅坚刚;邵悦;蒋涛华 申请(专利权)人: 南京科佰生物科技有限公司
主分类号: C12N15/867 分类号: C12N15/867
代理公司: 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司 11514 代理人: 王莹
地址: 210028 江苏省南京市栖霞区*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 病毒感染 试剂 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种慢病毒感染试剂,其特征在于:

所述试剂由第一组合物和第二组合物组成;

所述第一组合物为浓度为1-200mg/ml的二油酰基L-α-磷脂酰乙醇胺溶液;

所述第二组合物为浓度为5-500mg/ml的聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物溶液;

所述第一组合物和所述第二组合物分别独立包装。

2.权利要求1所述的慢病毒感染试剂的制备方法,其特征在于:

所述第一组合物的制备方法包括步骤:将水和二油酰基L-α-磷脂酰乙醇胺混合,然后过滤除菌,配制得到浓度为1-200mg/ml的二油酰基L-α-磷脂酰乙醇胺溶液,4℃保存备用;其中,所述水为无菌水;

所述第二组合物的制备方法包括步骤:将水和聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物混合,然后过滤除菌,配制得到浓度为5-500mg/ml的聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物溶液,4℃保存备用;其中,所述水为无菌水。

3.权利要求1所述的慢病毒感染试剂在慢病毒技术中的应用。

4.一种采用权利要求1所述的慢病毒感染试剂感染细胞的方法,其特征在于,包括步骤:

S1:将待感染细胞消化离心后,接种到孔板的培养基中;

S2:将所述第一组合物和所述第二组合物混合均匀,得到感染试剂;

S3:将所述感染试剂加入至含待感染细胞的培养基中,然后加入融化后的慢病毒,混合均匀后,感染预设时间;

S4:感染结束后,去除剩余的慢病毒和感染试剂,将感染后的细胞继续培养。

5.根据权利要求4所述的采用慢病毒感染试剂感染细胞的方法,其特征在于:

步骤S1中,所述孔板为24孔板,每孔中待感染细胞的数量为20000-50000个。

6.根据权利要求4所述的采用慢病毒感染试剂感染细胞的方法,其特征在于:

步骤S2中,所述第一组合物和所述第二组合物的体积比为1:(0.3-3)。

7.根据权利要求4所述的采用慢病毒感染试剂感染细胞的方法,其特征在于:

步骤S3中,所述感染试剂和所述含待感染细胞的培养基的体积比为1:(100-5000)。

8.根据权利要求4所述的采用慢病毒感染试剂感染细胞的方法,其特征在于:

步骤S3中,所述感染的时间为24-72小时。

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