[发明专利]神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：

链霉亲和素磁颗粒悬浮液

化学发光标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体

偶联标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中，链霉亲和素磁颗粒悬浮液质量百分比为0.01％～1％。

3.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素磁颗粒悬浮液中，链霉亲和素磁颗粒的粒径是0.05～3μm。

4.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体中，神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体与化学发光标记物摩尔比为1:(1～20)，化学发光标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体的浓度为≥0.1μg/mL。

5.根据权利要求1或4所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺和三联吡啶钌。

6.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体中，神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体与偶联标记物的摩尔比为1:(1～20)，偶联标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体的浓度为≥0.7μg/mL。

7.根据权利要求1或6所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记物为生物素。

8.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液，所述A液为硝酸溶液，B液为氢氧化钠溶液。

9.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括神经元特异性烯醇化酶校准品，

所述神经元特异性烯醇化酶校准品为浓度分别为0.00ng/mL、5ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、200ng/mL和500ng/mL的神经元特异性烯醇化酶溶液。

10.根据权利要求1所述的一种神经元特异性烯醇化酶化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：链霉亲和素磁颗粒悬浮液的制备

将链霉亲和素磁颗粒溶液和TBST溶液混匀后，放置在磁分离器上，直至上清液无混浊，弃上清，留取磁颗粒，清洗后在缓冲液中配成固相试剂；

步骤二：化学发光标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体的制备

将神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体放入离心管中离心，然后加入碳酸缓冲液，混匀后加入化学发光标记物溶液离心，将离心管密封后放入避光暗盒中，然后将暗盒放入气浴恒温振荡器中混匀，加入封闭液，放入气浴恒温振荡器中混匀，将封闭好的抗体经过纯化、收集，然后放入缓冲液中稀释，保存；

步骤三：偶联标记物标记的神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体的制备

将神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体放入离心管中离心，然后加入TRIS缓冲液，混匀后加入偶联标记物溶液离心，标记反应后加入赖氨酸继续反应，最后将反应液用脱盐柱纯化、收集后放入缓冲液中稀释，保存。