[发明专利]一种可用于全自动分析仪的人绒毛膜促性腺激素试纸条的使用和制备方法

权利要求书

1.一种可用于全自动分析仪的人绒毛膜促性腺激素试纸条的使用和制备方法，包括PVC胶板(1)，其特征在于：所述PVC胶板(1)的上表面左端设置有前方留白(2)，所述PVC胶板(1)的上表面右端设置有后方留白(5)，所述PVC胶板(1)的上表面位于所述前方留白(2)的一侧设置有样本垫(3-1)，所述PVC胶板(1)的上表面位于所述样本垫(3-1)的一侧设置有胶体金结合垫(3-3)，且胶体金结合垫(3-3)和样本垫(3-1)部分重叠，所述样本垫(3-1)和胶体金结合垫(3-3)的上表面附有保护膜胶带(3-2)，所述PVC胶板(1)的上表面靠近所述后方留白(5)的左侧设置有黑色检测块(4)，所述黑色检测块(4)的一侧背离所述后方留白(5)的位置设置有吸水材料(3-6)，所述吸水材料(3-6)的上表面贴有含警戒线的保护膜胶带(3-7)，所述胶体金结合垫(3-3)和吸水材料(3-6)的间隔处设置有包被膜(3-8)，所述包被膜(3-8)的上表面设置有检测线(3-4)和质控线(3-5)，所述检测线(3-4)靠近所述胶体金结合垫(3-3)的一端；

一种可用于全自动分析仪的人绒毛膜促性腺激素试纸条的使用和制备方法，所述制备方法如下：

步骤一：材料准备，PVC胶板(1)长约11cm、宽约0.50cm、厚约0.01cm；玻璃纤维滤纸材料的样本垫(3-1)，长约2.50cm、厚约0.08cm；保护膜胶带(3-2)长约2.00cm、厚约0.001cm，其上标注警戒线；玻璃纤维滤纸材料的胶体金结合垫(3-3)，长约0.60cm、厚约0.07-0.08cm；检测线(3-4)划上抗β-hCG单抗(2.0mg/mL，0.2uL/cm)；质控线(3-5)划上羊抗鼠IgG抗体(2.5mg/mL，0.2uL/cm)；吸水材料(3-6)长约3.40cm、厚约0.08-0.10cm；含警戒线的保护膜胶带(3-7)厚约0.001cm；硝基纤维素膜(即硝酸纤维素膜)材料的包被膜(3-8)，长约2.00cm、厚约0.01cm；黑色检测块(4)；后方留白(5)；

步骤二：样本垫(3-1)在样品垫处理液内浸湿处理后取出，相对湿度≤30％，风干3.8-4.2h，密封保存，备用储存期限14个月；

步骤三：胶体金结合垫(3-3)制备，取2％沸腾的柠檬酸三钠溶液倒入沸腾的2％氯金酸溶液，待混合溶液颜色变为深红色时，继续煮沸35-45min，室温冷却，加入高纯水稀释；确定0.2MK2CO3溶液的使用量,称取碳酸钾(K2CO3)2.76g，高纯水定容至100mL后，0.22um过滤，2-8℃密封保存；每毫升胶体金加入0.2M K2CO3溶液的使用量，搅拌8-12min；再加入0.01M缓冲液，调节稀释溶液PH值，再加入鼠抗α-hCG单抗20ug，搅拌110-130min，再加入10％BSA溶液100uL，搅拌110-130min，离心后，吸取沉淀，选取玻璃纤维素滤纸为免疫金垫材料，将离心后收集的沉淀溶液喷置在玻璃纤维素滤纸上，60℃烘干8-20min或者16.5-28℃晾干，密封保存；

步骤四：包被膜(3-8)选用硝基纤维素膜(即硝酸纤维素膜)材料，预处理：硝酸纤维素膜浸润在高纯水中1.8-2.2h后取出晾干，再用膜处理液浸泡8-12min后取出晾干，再裁切成条带，粘贴在PVC胶板(1)上，在检测线(3-4)位置划上抗β-hCG单抗(2.0mg/mL，0.2uL/cm)，质控线(3-5)位置划上羊抗鼠IgG抗体(2.5mg/mL，0.2uL/cm)，在相对湿度≤30％，57-63℃，烘干1.8-2.2h，密封保存；

步骤五：将已按上述要求配置的包被膜(3-8)粘贴固定至PVC胶板(1)，再依次按上述要求配置的样本垫(3-1)、胶体金结合垫(3-3)、吸水材料(3-6)组装到已经有包被膜(3-8)的PVC胶板(1)，在样本垫(3-1)上按上述要求贴上含警戒线的保护膜胶带(3-2)，吸水纸条上贴上含警戒线的保护膜胶带(3-7)，切成试纸条，对试纸条进行最低检测限测试，并与hLH、hFSH、hLH、hTSH高浓度样本进行阴阳性特异性分析，最低检测限≤25mIU/mL，,密封，于4-30℃保存；

所述使用方法如下：

步骤一：采用全自动分析仪加样针或者人工使用滴管或者滴管/移液枪加样约60uL样本(尿液、血清或者血浆样本)至试纸条的样本垫(3-1)区域，2-5s后，样本沿着样本垫(3-1)→胶体金结合垫(3-3)→包被膜(3-8)方向进行层析，待紫红色条带出现；

步骤二：对步骤一的紫红色条带进行判读，确定为阴性、阳性或者无效；

步骤三：妊娠初期hCG浓度低，测试结果可能为阴性，在48-72h后重新采集标本测定。