[发明专利]一种草鱼出血病口服型疫苗及其制备与用途在审
| 申请号： | 201810949894.7 | 申请日： | 2018-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN109053900A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 余新炳;姜红烨;林志鹏;周心怡;边青 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/75;A61K39/15;A61P31/14;A61P7/04 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 许亦琳;余明伟 |
| 地址： | 510275 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 氨基酸序列 呼肠孤病毒 口服型疫苗 口服疫苗 融合蛋白 鱼出血病 草鱼 鱼体 种草 枯草芽孢杆菌芽孢 免疫保护效果 生物技术领域 草鱼出血病 核苷酸序列 衣壳蛋白 制备工艺 注射免疫 捕捞 损伤 注射 疫苗 抵抗 | ||
1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含有枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotC和草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白，所述草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白的氨基酸序列对应于如SEQ IDNO.8所示核苷酸序列所编码的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白的编码核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotC的氨基酸序列对应于如SEQ ID NO.7所示核苷酸序列所编码的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotC的编码核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
5.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列中含有如SEQ ID NO.9所示核苷酸序列所编码的氨基酸序列。
6.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列中含有如SEQ ID NO.10所示核苷酸序列所编码的氨基酸序列。
7.一种制备如权利要求1～6任一权利要求所述融合蛋白的方法，包括如下步骤：
(1)获得目的基因；
(2)构建重组质粒：将步骤(1)所得目的基因以及载体质粒进行连接，获得重组质粒；
(3)将步骤(2)所得重组质粒导入感受态细胞，转化；
(4)筛选阳性克隆，并将正确的重组质粒转化宿主感受态细胞；
(5)诱导表达融合蛋白。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，还包括以下特征中的任一项或多项：1)步骤(1)中，所述目的基因的核苷酸序列含有枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotC的编码核苷酸序列和草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白的编码核苷酸序列；2)步骤(3)中，所述感受态细胞为DH-5α感受态细胞；3)步骤(4)中，所述宿主感受态细胞为枯草芽孢杆菌WB600感受态细胞。
9.如权利要求1～6任一权利要求所述融合蛋白在制备草鱼出血病口服疫苗中的用途。
10.一种草鱼出血病口服疫苗，含有如权利要求1～6任一权利要求所述融合蛋白。
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