[发明专利]一种L-丙氨酸异丙酯中对映异构体含量的检测方法

说明书

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种L‑丙氨酸异丙酯盐酸盐中对映异构体含量的高效液相色谱检测方法。所述方法包括：照高效液相色谱法测定，用冠醚手性色谱柱，以pH1.0的高氯酸水溶液为流动相。本发明可以有效地分离L‑丙氨酸异丙酯盐酸盐及其对映异构体，能够更准确地检测对映异构体的含量。本方法采用反相方法，等度洗脱，简单易操作，且峰形较好，分离度合格；方法学验证显示本方法专属性强，灵敏度高，准确度、耐用性均良好。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种L-丙氨酸异丙酯盐酸盐中对映异构体含量的高效液相色谱检测方法。

背景技术

L-丙氨酸异丙酯盐酸盐：分子式为C₆H₁₄ClNO₂，分子量为167.63，其化学结构为：

L-丙氨酸异丙酯盐酸盐为替诺福韦艾拉酚胺合成过程中的一种重要的起始原料，具有一个手性中心，L-丙氨酸异丙酯盐酸盐的对映异构体杂质是替诺福韦艾拉酚胺手性杂质来源之一，需严格地控制L-丙氨酸异丙酯盐酸盐对映体的含量。

目前L-丙氨酸异丙酯盐酸盐对映异构体无药典等法定标准。因此，有必要开发一种检测L-丙氨酸异丙酯盐酸盐中对映异构体的方法，该方法必须能够有效分离L-丙氨酸异丙酯盐酸盐及其对映异构体。有鉴于此，本发明提供了一种方法，能够满足该要求，该方法能够有效分离L-丙氨酸异丙酯盐酸盐及其对映异构体，保证检测的有效性，能够准确严格地控制L-丙氨酸异丙酯盐酸盐的质量。

发明内容

本发明为解决该问题提供了一种L-丙氨酸异丙酯盐酸盐中对映异构体含量的高效液相色谱检测方法，该方法能够有效分离L-丙氨酸异丙酯盐酸盐及其对映异构体，保证检测的有效性，能够准确严格地控制替诺福韦艾拉酚胺的质量，该方法专属性强，灵敏度高，准确度与耐用性良好。

本发明提供了一种L-丙氨酸异丙酯盐酸盐中对映异构体含量的高效液相色谱检测方法。所述方法包括：照高效液相色谱法测定，用冠醚手性色谱柱，以pH1.0的高氯酸水溶液为流动相，在一定条件下进行等度洗脱。包括以下步骤：

在高效液相色谱仪上进行检测

色谱柱填充剂：硅胶表面涂敷有手性冠醚

柱温：15℃~25℃

流速：0.3mL/min~0.7 mL/min

检测波长：203nm~207nm

流动相：酸性水溶液

稀释液：纯化水

系统适用性溶液配制：分别取杂质TN-SM2-R2对照品、对映异构体对照品和L-丙氨酸异丙酯盐酸盐各适量，加纯化水溶解并稀释制成每1ml中约含杂质TN-SM2-R2和对映异构体各50μg，含L-丙氨酸异丙酯盐酸盐2.5mg的混合溶液，作为系统适用性溶液。

样品溶液配制：取本品适量，精密称定，置量瓶中，加纯化水溶解并稀释制成每1ml约含5mg的溶液。

对照溶液配制：取样品溶液适量，加纯化水稀释制成每1ml约含25μg的溶液。

所述色谱柱以硅胶表面涂敷有手性冠醚为填充剂，优选CROWNPAKCR（+）（4.0mm×150mm，5μm）。

所述流动相流动相为pH1.0~2.0的高氯酸水溶液，pH优选1.0。

所述柱温为15℃~25℃，优选20℃。

所述流速为0.3 mL/min~0.7mL/min，优选0.5 mL/min。

所述波长为203nm~207nm，优选205nm。