[发明专利]用于检测rs12041331的引物探针组及其应用在审
申请号: | 201810951485.0 | 申请日: | 2018-08-21 |
公开(公告)号: | CN108949964A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 丛茜;刘婷婷;李朋;赵海文;吴守峰;李欣;邱茂仁;穆磊 | 申请(专利权)人: | 潍坊德诺泰克生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11 |
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地址: | 261000 山东省潍坊市滨海*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单链DNA分子 引物探针 引物F 引物R 探针 检测 应用 荧光淬灭基团 待测样本 核苷酸序 荧光基团 核苷酸 基因型 锁核酸 可用 位点 | ||
1.引物探针组,由引物F、引物R和探针P组成;
引物F为如下(a1)或(a2):
(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;
(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;
引物R为如下(b1)或(b2):
(b1)序列表的序列2所示的单链DNA分子;
(b2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;
探针P为一个末端具有荧光基团且另一个末端具有荧光淬灭基团的单链DNA分子,且DNA分子中的部分核苷酸为锁核酸,DNA分子的核苷酸序列为如下(c1)或(c2):
(c1)序列表的序列3所示;
(c2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加。
2.如权利要求1所述的引物探针组,其特征在于:所述探针P的核苷酸序列如序列表的序列3所示,且第2-4位核苷酸和第23-25位核苷酸均为锁核酸。
3.权利要求1或2所述引物探针组在制备用于检测rs12041331的试剂盒中的应用。
4.一种用于检测rs12041331的试剂盒,包括权利要求1或2所述引物探针组。
5.组件甲和组件乙在制备用于检测rs12041331的试剂盒中的应用;组件甲为权利要求1或2所述引物探针组;组件乙为试剂或试剂组合,组件乙的功能为用血液样本制备用于荧光定量PCR的模板样本。
6.一种用于检测rs12041331的试剂盒,包括组件甲和组件乙;组件甲为权利要求1或2所述引物探针组;组件乙为试剂或试剂组合,组件乙的功能为用血液样本制备用于荧光定量PCR的模板样本。
7.一种用血液样本制备用于荧光定量PCR的模板样本的试剂盒,包括裂解液;所述裂解液为所述裂解液为1.5-2 g/100ml的NaCl水溶液。
8.一种用血液样本制备用于荧光定量PCR的模板样本的方法,包括如下步骤:
(1)取抗凝血,加入权利要求7中所述的裂解液,颠倒混匀,离心弃上清;
(2)完成步骤(1)后,加入保存液,先60-70℃水浴,再80-90℃水浴,然后离心,使用时取上清,即为模板样本。
9.特异探针在进行荧光定量PCR检测中的应用;所述特异探针为具有锁核酸修饰的分子信标。
10.一种用于荧光定量PCR检测的特异探针,为具有锁核酸修饰的分子信标。
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