[发明专利]一种硫酸多粘菌素B的制备方法

权利要求书

1.一种硫酸多粘菌素B的制备方法，其特征在于，其至少包括以下步骤：

(1)多粘菌素B种子制备：将产多粘菌素B菌种置于培养基A中进行复苏培养，然后置于培养基B中进行摇床培养，得到活化的产多粘菌素B菌种；

(2)发酵：将步骤(1)得到的活化的产多粘菌素B菌种加入至培养罐C中，种子罐培养；然后置于培养罐D中，进行发酵罐培养，得到多粘菌素B菌种的发酵液；

(3)精制：对步骤(2)得到的多粘菌素B菌种的发酵液进行过滤、离子交换树脂处理、大孔树脂处理、解吸液碱结晶、转盐、脱色、纳滤浓缩、真空冷冻干燥，得到硫酸多粘菌素B；所述离子交换树脂为强酸阳离子树脂；所述强酸阳离子树脂为4-磺酰胺苯甲酰亚胺和4-磺酸基吡啶-3-磺酰胺改性732阳离子交换树脂；所述步骤(2)中发酵罐培养过程中还包括补料过程，所述补料配方中每100ml培养基含有以下组份：L-苏氨酸0.01-0.1g、硫酸铵0.1-0.5g、余量为水；所述步骤(1)中产多粘菌素B菌种为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)。

2.根据权利要求1所述硫酸多粘菌素B的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中所述培养基A中每100ml培养基含有以下组份：蔗糖1-3g、蛋白胨1-5g、磷酸氢二钾0.1-0.5g、七水硫酸镁0.2-1g、琼脂1-3g、余量为水。

3.根据权利要求1所述硫酸多粘菌素B的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中所述培养基B中每100ml培养基含有以下组份：小麦粉7-10g、淀粉酶0.002-0.01g、酵母粉0.2-0.6g、碳酸钙0.1-0.5g、磷酸氢二钠0.01-0.03g、硫酸铵0.2-0.7g、余量为水。

4.根据权利要求1所述硫酸多粘菌素B的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述培养罐C中每100ml培养基含有以下组份：小麦粉7-10g、淀粉酶0.002-0.01g、酵母粉0.2-0.6g、碳酸钙0.1-0.5g、磷酸氢二钠0.01-0.03g、硫酸铵0.2-0.7g、消泡剂0.01-0.05g、余量为水。

5.根据权利要求1所述硫酸多粘菌素B的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述培养罐D中每100ml培养基含有以下组份：小麦粉10-15g、淀粉酶0.002-0.01g、酵母粉0.5-1g、碳酸钙0.1-0.5g、磷酸氢二钠0.01-0.03g、硫酸铵0.2-0.7g、消泡剂0.01-0.05g、L-苏氨酸0.01-0.1g、余量为水。

6.根据权利要求1所述硫酸多粘菌素B的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中大孔树脂包括D001、D113、D201、D301、D370、D152中一种。