[发明专利]一种捕获基因组特定DNA片段的方法

权利要求书

1.一种捕获基因组特定DNA片段的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)待检DNA与含有特定片段sgRNA探针/基因编辑蛋白复合物结合，温浴切割DNA；

(2)特定片段DNA构建测序文库；

(3)通过测序确定特定片段DNA序列。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的sgRNA探针为基因编辑蛋白识别特定片段所需的探针，探针序列与特定片段互补，特定片段是一个或是多个靶标，每一个特定片段至少需要前后两个探针，中间间隔距离根据后期的检测要求调整。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，sgRNA探针/基因编辑蛋白复合物结合DNA后，37℃温浴30分钟，实现特定片段DNA切割。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括通过清洗、过柱去除非特定片段DNA的步骤。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，构建测序文库的方法是：切割下来的DNA，通过T4 DNA聚合酶、Klenowexo-、T4 DNA磷酸激酶(T4 DNA PNK)、Taq聚合酶或Klenow酶中的一种或多种补平和增加碱基A，37℃反应20分钟；加入细菌碱性磷酸酶(BAP)1分钟后，75℃变性5～10分钟，待温度降低后加入DNA连接酶、DNA接头，20℃连接20分钟；纯化去除反应体系中的蛋白和缓冲液，构建DNA测序文库，直接用于后续检测；若测序文库浓度过低，通过PCR方法扩增富集。