[发明专利]一种青牛胆组培快繁方法有效
申请号: | 201810969800.2 | 申请日: | 2018-08-24 |
公开(公告)号: | CN108935105B | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 张金渝;蒋元省;杨维泽;曾祥飞;杨美权;许宗亮;赵露琴 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院药用植物研究所;云南昊辰农业有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 上海德悦知识产权代理事务所(普通合伙) 31344 | 代理人: | 徐俊 |
地址: | 650205 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 青牛胆组培快繁 方法 | ||
1.一种青牛胆组培快繁方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)外植体选择:选择健壮植株栽植于室内,每隔7天用75%多菌灵500倍液喷施3-5次,选取幼嫩茎段;
(2)外植体消毒:将选取的外植体用饱和肥皂水溶液涮洗后冲淋,在超净工作台上依次用酒精、漂白粉溶液及升汞溶液消毒;
(3)丛生芽诱导:将消毒好的外植体,剪去两端伤口,切成带单芽茎段,接种在诱导培养基上,在一定温度、光照强度和光周期环境下培养;
(4)丛生芽增殖:将诱导出的丛生芽切成单芽,接种在增殖培养基上,在一定温度、光照强度和光周期环境下培养;
(5)丛生芽生根:将增殖获得的丛生芽分成单芽,接种在生根培养基上,在一定温度、光照强度和光周期环境下培养;
其中,
步骤(2)中所述的外植体的最佳消毒方法为75%酒精消毒30~40s,饱和漂白粉溶液消毒30~40min,0.1%升汞溶液+吐温-80消毒10~15min;
步骤(3)中所述的诱导培养基为WPM+IAA 0.01~0.1mg/L+KT 2.0~3.0mg/L+TDZ 0.05~0.2mg/L+活性炭0.5g/L,培养温度为23~27℃,以光照强度1000~2000lx,单日光照时间12h进行光暗交替培养;
步骤(4)中所述的增殖培养基为MS+NAA 0.01~0.1mg/L+KT 2.0~3.0mg/L +TIBA 1.0~2.0mg/L+硝酸银1.0μg/L+椰汁50~100ml/L,培养温度为23~27℃,以光照强度1000~2000lx,单日光照时间12h进行光暗交替培养;
步骤(5)中所述的生根培养基为1/2MS+IBA 1.0~2.0mg/L+椰汁50~100ml/L+活性炭0.5g/L,培养温度为23~27℃,以光照强度3000~4000lx,单日光照时间12h进行光暗交替培养。
2.根据权利要求1所述的一种青牛胆组培快繁方法,其特征在于,步骤(1)所述的幼嫩茎段为端部20~30cm的茎段。
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