[发明专利]一种液滴数字PCR芯片及其使用方法

权利要求书

1.一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，集成了液滴形成、扩增与检测三个功能单元；

所述芯片液滴形成单元包含油孔、PCR试剂孔及相应管道，油孔管道与PCR试剂孔管道形成十字交叉；

所述芯片扩增单元为蛇形管道；

所述芯片检测单元包括动态检测位和静态检测位，所述动态检测位为管道，所述静态检测位为方形仓；

所述芯片上含有通气孔。

2.如权利要求1所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，所述芯片由盖片和基片组成，所述盖片上至少包含1个PCR试剂孔和1个油孔，所述基片上包含仓室及管道。

3.如权利要求1所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，芯片的扩增单元与外部温控系统耦合，形成温度梯度带。

4.如权利要求1所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，采用流动式扩增方法，PCR液滴形成后顺序流经扩增区域的蛇形管道，实现扩增过程。

5.如权利要求4所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，所述扩增过程包括等温扩增和变温扩增。

6.如权利要求1所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，所述芯片表面透明，制作材料选用PS、PC、COC、COP、PMMA、PTFE或PDMS的一种或多种组合。

7.如权利要求1所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，可形成2万至2千万个PCR液滴，液滴尺寸为2皮升至0.2毫升。

8.如权利要求1所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，可用两种方法检测扩增结果，包括动态检测和静态检测。

9.如权利要求8所述的一种液滴数字PCR芯片，其特征在于，所述动态检测指在动态检测位配套光学检测模块，实时检测完成扩增的液滴，所述静态检测指在静态检测位收集所有扩增后的液滴，利用CCD相机同时检测。

10.一种使用如权利要求1～9任一项所述的一种液滴数字PCR芯片的使用方法，其特征在于，

（1）在PCR试剂孔和油孔中注入相应试剂；

（2）在PCR试剂孔和油孔上加盖密封垫；

（3）驱动试剂孔和油孔中的液体流动至十字交叉处，形成大小均一的PCR反应液滴；

（4）PCR反应液滴依次流经扩增的蛇形管道，完成扩增反应；

（5）在动态检测位实时检测阳性液滴，或待扩增反应全部完成后在静态检测位同时检测阳性液滴。