[发明专利]一种双歧杆菌复合剂及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及微生物复合制剂领域，提供一种双歧杆菌复合剂，制备原料包括双歧杆菌和蛋白酶解多肽；双歧杆菌复合剂中所含活菌数在10¹⁰cfu/g以上；所述蛋白酶解多肽中多肽的质量含量在75％以上、所述蛋白酶解多肽中相对分子量1000Da以下的多肽的质量占比不低于80％，所述蛋白酶解多肽中天冬氨酸的质量百分数在1％以上，谷氨酸质量分数在5％以上。本发明研究表明，双歧杆菌和蛋白酶解多肽复配后，能够显著提高双歧杆菌的增强免疫力以及调节肠道菌群作用。在制备过程中，蛋白酶解多肽还能够起到促进双歧杆菌增殖、缩短发酵时间的作用以及冻干保护作用。

技术领域

本发明涉及微生物复合制剂领域，具体涉及一种双歧杆菌复合剂及其制备方法和应用。

背景技术

双歧杆菌是人和动物肠道最主要的有益菌之一，对维持肠道的微生态平衡起着重要作用，研究证实双歧杆菌具有抗感染、抗肿瘤、增强免疫、延缓机体衰老等多种功效。随着年龄的增加，饮食及环境因素的变化，肠道菌群会呈现动态变化，研究表明，肠道中双歧杆菌只有在足够高活菌数的条件下才能发挥以上所述益生作用。现有的双歧杆菌制剂存在活菌数高，不够稳定，生产成本较高等问题，因而如何得到生产成本低、活菌数高、品质稳定且保存期长的菌粉成为一大难题。

发明内容

本发明为了解决现有技术中双歧杆菌制剂益生效果作用不够显著的问题，提供了一种双歧杆菌复合剂，其中的双歧杆菌与蛋白酶解多肽存在协同作用，能够显著提高双歧杆菌的益生效果。

为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种双歧杆菌复合剂，制备原料包括以下重量份的组分：双歧杆菌85～90份和蛋白酶解多肽0.6～16.2份；所述蛋白酶解多肽的重量以干重计；

所述双歧杆菌复合剂中所含活菌数在10¹⁰cfu/g以上；

所述蛋白酶解多肽中多肽的质量含量在75％以上、所述蛋白酶解多肽中相对分子量1000Da以下的多肽的质量占比不低于80％，所述蛋白酶解多肽中天冬氨酸的质量百分数在1％以上，谷氨酸质量分数在5％以上。

优选的，所述双歧杆菌选自乳双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、两歧双歧杆菌或青春双歧杆菌中的一种。

优选的，所述蛋白酶解多肽选自蛋白酶解液或蛋白酶解多肽干粉。

优选的，所述蛋白酶解多肽选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中一种或多种酶解蛋白的产物。

优选的，所述用于制备蛋白酶解多肽的蛋白选自大豆、玉米、豌豆、小麦、鸡蛋清和鱼胶原蛋白中的一种或多种。

本发明提供了一种上述技术方案所述双歧杆菌复合剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将双歧杆菌接种至种子培养基中活化，得到一级种子液；

(2)将所述一级种子液接种至种子培养基中厌氧培养24～36h，得到二级种子液；

(3)将所述二级种子液接入种子培养基中厌氧培养24～36h，得到三级种子液；

(4)将所述三级种子液接入含有蛋白酶解多肽的发酵培养基中进行高密度发酵，离心取沉淀，得到菌泥；

(5)将所述菌泥与冻干保护剂混合后进行乳化包埋，得到乳化液；

按质量百分比计，所述冻干保护剂包括8～20％脱脂乳粉和1.5～6％蛋白酶解多肽和其余量的水；

(6)将得到的乳化液冷冻干燥，粉碎，得到双歧杆菌复合剂。