[发明专利]痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒

权利要求书

1.一种痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，包括：与2种内参照基因ACTB、GAPDH及6种痛风性关节炎急性发作期差异表达基因IL1B、P2RX7、CXCL8、TLR2、TLR4、NLRP3的cDNA互补配对的特异性引物探针SEQ ID NO.1-93。

2.根据权利要求1所述的痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，

ACTB探针为SEQ ID NO.8，其使用的荧光基团为FAM；

GAPDH探针为SEQ ID NO.11、18中的任意一种，其使用的荧光基团为TAMRA；

TLR2探针为SEQ ID NO.24、27、30、36中的任意一种，其使用的荧光基团为CY5；

TLR4探针为SEQ ID NO.43、46中的任意一种，其使用的荧光基团为ROX；

NLRP3探针为SEQ ID NO.53、56中的任意一种，其使用的荧光基团为JOE；

IL1B探针为SEQ ID NO.63、66中的任意一种，其使用的荧光基团为CY5；

P2RX7探针为SEQ ID NO.74、77中的任意一种，其使用的荧光基团为ROX；

CXCL8探针为SEQ ID NO.84、90、93中的任意一种，其使用的荧光基团为JOE。

3.根据权利要求2所述的痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，

与ACTB基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.1-7中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与GAPDH基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.9、10、12-17中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与TLR2基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.19-23、25、26、28、29、31-35中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与TLR4基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.37-42、44、45中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与NLRP3基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.47-52、54、55中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与IL1B基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.57-62、64、65中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与P2RX7基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.67-73、75、76中任意一对匹配的正向引物和反向引物；

与CXCL8基因cDNA互补配对的特异性引物为SEQ ID NO.78-83、85-89、91、92中任意一对匹配的正向引物和反向引物。

4.根据权利要求3所述的痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，还包括用于2管多重荧光定量PCR的第一管PCR反应液和第二管PCR反应液。

5.根据权利要求4所述的痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，所述第一管PCR反应液包括ACTB正向引物、ACTB反向引物、ACTB探针、GAPDH正向引物、GAPDH反向引物、GAPDH探针、TLR2正向引物、TLR2反向引物、TLR2探针、TLR4正向引物、TLR4反向引物、TLR4探针、NLRP3正向引物、NLRP3反向引物和NLRP3探针。

6.根据权利要求5所述的痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，所述第一管PCR反应液还包括无Mg²⁺离子PCR缓冲液、Mg²⁺、dNTP混合液和热启动聚合酶。

7.根据权利要求6所述的痛风差异表达基因检测与急性发作预警试剂盒，其特征在于，所述第一管PCR反应液总各组分的反应终浓度分别为：