[发明专利]一种多菌种复合发酵玫瑰花酵素的制备方法

权利要求书

1.一种多菌种复合发酵玫瑰花酵素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)玫瑰花酶解提汁

将玫瑰花破碎加水搅拌，其中加水量按玫瑰花重量份，1份玫瑰花中加入4-25份纯净水；搅拌均匀后按总重量分别加入0.01-0.03％的果胶酶和纤维素酶，在酶解温度40℃—45℃条件下酶解3-4h；

步骤2)玫瑰汁过滤

将步骤1)酶解后的玫瑰汁用带有100目不锈钢筛网的三足式离心机分离除渣，获得玫瑰汁；

步骤3)玫瑰茄汁和甘草提汁

按重量份，将干玫瑰茄清洗干净后，在1份干玫瑰茄中加入70-100份纯净水，在95℃—100℃煮沸5-10min，过滤除渣，获得玫瑰茄汁；

按重量份，在1份甘草加入5份纯净水，煮沸10min，沥去汁液，再按甘草初重，在1份甘草中再加入10-15份纯净水，煮沸30min，过滤除渣，获得甘草汁；

步骤4)发酵液配制

分别称取步骤2)获得的玫瑰汁和步骤3)获得玫瑰茄汁和甘草汁，以及蔗糖、乳清蛋白粉、NaCl和K₂HPO₄按以下质量配比进行配料，得到发酵液：

玫瑰汁75-85％，玫瑰茄汁7-14％，甘草汁2-5％，蔗糖8-15％，乳清蛋白粉1-3％，NaCl0.5-1.3％，K₂HPO₄0.1-0.2％；

步骤5)发酵液杀菌

将步骤4)配制好的发酵液通过搅拌混合均匀并完全溶解固体物料后，用列管式加热器加热至95℃—100℃，直接通入到无菌乳酸发酵罐中，自然冷却；

步骤6)乳酸发酵

在无菌条件下接种乳酸菌种子液于步骤5)得到的自然冷却的发酵液中，乳酸菌种子接种量按发酵液体积5-7％接入，要求发酵温度控制在37℃—40℃，乳酸发酵罐罐压维持在0.1Pa—0.3Pa之间，待发酵液总酸含量达到2％时乳酸发酵结束，发酵时间在36-48h之间，得到乳酸发酵好的发酵液；

步骤7)酒精发酵

将步骤6)乳酸发酵好的发酵液转入无菌的酒精发酵罐中，接入高活性干啤酒酵母菌粉，接种量按发酵液重量0.05-0.1％接种；在25℃-28℃发酵4-5天，发酵液酒精度达到6％v/v以上时，酒精发酵结束，得到酒精发酵液；

步骤8)醋酸发酵

将步骤7)得到的酒精发酵液置于醋酸发酵罐中，加入上一批醋酸发酵旺盛、发酵液表面已形成醋膜的发酵液，加入量以酒精度为6％的发酵液与上一批醋酸发酵旺盛的发酵液重量比3:1加入，混合均匀后，在室温不低于0℃的自然条件下静置发酵，每天从醋酸发酵罐底部通入无菌空气1次，通气时间5min，通气强度以发酵液顶部仅有很少量气泡溢出为准，通气量为0.10VVm；待发酵液酒精度下降至0.5％v/v时醋酸发酵结束；

步骤9)热处理

将步骤8)醋酸发酵结束的玫瑰发酵液加热至65-80℃，保温20min，进行杀菌和热处理，之后迅速冷却至室温，获得玫瑰酵素。

2.根据权利要求1所述的多菌种复合发酵玫瑰花酵素的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述的玫瑰花为能食用的玫瑰花品种，剔除玫瑰花中的树枝、树叶及其它杂物，用清水冲洗干净，沥干水分备用。

3.根据权利要求1所述的多菌种复合发酵玫瑰花酵素的制备方法，其特征在于，步骤1)中，当所述玫瑰花为新鲜玫瑰花时，按照1份新鲜玫瑰花中加入4-9份纯净水；当所述玫瑰花为干玫瑰花时，按照1份干玫瑰花中加入20-25份纯净水，且干玫瑰花先用少量水浸泡30min，用锤式粉碎机破碎，再将剩余水加入。

4.根据权利要求1所述的多菌种复合发酵玫瑰花酵素的制备方法，其特征在于，步骤6)中，乳酸菌种子液的制备方法为：

取已活化好的植物乳杆菌、发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌3株固体试管菌种，分别转接于三角瓶MRS无菌液体培养基中进行培养，在温度37℃下静止培养24h；将已培养好的3株三角瓶乳酸菌液在无菌条件下等体积混合，接入已灭菌的乳酸菌种子培养基中，按种子培养基重量的5-7％进行接种，种子罐温度控制为37℃—40℃，罐压维持在0.1Pa—0.3Pa之间，培养时间36-48h，待种子液中乳酸菌数量达到1×10⁹个/mL以上时结束，得到乳酸菌种子液。