[发明专利]一种平板培养基酶活性测定方法有效

专利信息
申请号: 201810991302.8 申请日: 2018-08-22
公开(公告)号: CN109136328B 公开(公告)日: 2023-09-01
发明(设计)人: 叶楠;付刚;金鑫;龚岳斌 申请(专利权)人: 杭州俊丰生物工程有限公司
主分类号: C12Q1/34 分类号: C12Q1/34
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 310023 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 平板 培养基 活性 测定 方法
【权利要求书】:

1.一种平板培养基酶活性测定方法,其特征在于:①取含酶平板固体琼脂培养基,加入缓冲液,粉碎;②加入α-琼胶酶进行处理;③取琼胶酶处理液离心上清进行酶活性测定,所述含酶平板固体琼脂培养基加入的酶是青霉素酶、头孢菌素酶、金属β-内酰胺酶或大环内酯酶。

2.根据权利要求1,其特征在于:所述平板固体琼脂培养基是胰酪大豆胨琼脂培养基,营养琼脂培养基,沙氏葡萄糖琼脂培养基,普通肉汤琼脂培养基。

3.根据权利要求1,其特征在于:悬浮固体培养基的缓冲液为磷酸盐缓冲液,乙酸-乙酸钠缓冲液,柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,Tris-盐酸缓冲液。

4.根据权利要求1,其特征在于:粉碎琼脂的温度为4~25℃,采用研磨,机械搅拌或超声方式,将琼脂块粉碎。

5.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶来源于弧菌属、假单胞菌属、单胞菌属,或者采用基因工程技术表达分离纯化的重组α-琼胶酶。

6.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶水解琼脂培养基的温度为37~40℃。

7.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶水解琼脂培养基的pH为6.0~8.0。

8.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶水解琼脂培养基的时间为30~120分钟。

9.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶的用量是1~5U/ml。

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