[发明专利]一种平板培养基酶活性测定方法有效
申请号: | 201810991302.8 | 申请日: | 2018-08-22 |
公开(公告)号: | CN109136328B | 公开(公告)日: | 2023-09-01 |
发明(设计)人: | 叶楠;付刚;金鑫;龚岳斌 | 申请(专利权)人: | 杭州俊丰生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 310023 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 平板 培养基 活性 测定 方法 | ||
1.一种平板培养基酶活性测定方法,其特征在于:①取含酶平板固体琼脂培养基,加入缓冲液,粉碎;②加入α-琼胶酶进行处理;③取琼胶酶处理液离心上清进行酶活性测定,所述含酶平板固体琼脂培养基加入的酶是青霉素酶、头孢菌素酶、金属β-内酰胺酶或大环内酯酶。
2.根据权利要求1,其特征在于:所述平板固体琼脂培养基是胰酪大豆胨琼脂培养基,营养琼脂培养基,沙氏葡萄糖琼脂培养基,普通肉汤琼脂培养基。
3.根据权利要求1,其特征在于:悬浮固体培养基的缓冲液为磷酸盐缓冲液,乙酸-乙酸钠缓冲液,柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,Tris-盐酸缓冲液。
4.根据权利要求1,其特征在于:粉碎琼脂的温度为4~25℃,采用研磨,机械搅拌或超声方式,将琼脂块粉碎。
5.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶来源于弧菌属、假单胞菌属、单胞菌属,或者采用基因工程技术表达分离纯化的重组α-琼胶酶。
6.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶水解琼脂培养基的温度为37~40℃。
7.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶水解琼脂培养基的pH为6.0~8.0。
8.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶水解琼脂培养基的时间为30~120分钟。
9.根据权利要求1,其特征在于:α-琼胶酶的用量是1~5U/ml。
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