[发明专利]一种用于诊断前列腺癌的层析试纸条及其制备方法和应用

说明书

本发明一种用于诊断前列腺癌的层析试纸条，包括一个底板，底板上依次重叠设置有样品垫、结合垫、隔血层、层析垫和吸水垫，结合垫上设置有偶联了抗总前列腺癌特异抗原抗体的磁性纳米免疫探针；层析垫上依次设置有第一检测线、第二检测线和质控线，第一检测线上设置有抗游离前列腺癌特异抗原的单克隆抗体，第二检测线上设置有结合抗α‑1抗糜蛋白酶ACT的前列腺特异抗原的抗体，质控线上设置能结合total PSA抗体的IgG抗体。本发明还提供了上述试纸条的制备方法。本发明能大大减低原来在检测线上预设free PSA与total PSA之间由于检测位点部分重叠，而导致的无法准确定量两种抗原比值的问题，提高检测结果的准确性。

技术领域

本发明属于生物检测领域，涉及一种试纸条，具体来说是一种用于诊断前列腺癌血清学标志物的层析试纸条及其制备方法和应用。

背景技术

侧向免疫层析技术（Lateral Flow ImmunoAssay, LFIA）是一个近年来引起广泛关注的方法。该技术近年来得到了迅猛的发展。它基于免疫夹心反应，可以在硝酸纤维素试纸条上，实现靶标物的快速、特异性、较高灵敏度的检测。目前已经发展出了胶体金免疫层析技术、免疫酶染色层析，和磁性免疫层析等方法，未来，免疫层析技术将朝着定量、高灵敏度、多元检测、层析系统集成化等方向发展。该技术具有快速、简便，且不需要复杂、昂贵的检测设备等优点，而且可以被检测的标本种类广泛，可用于血液检、尿液检和粪便检测等各种样本的检测。因此，已经广泛应用于食源性致病菌、蛋白、病原微生物、毒素、环境污染物等物质的检测领域。

磁性免疫层析技术是以磁性纳米材料代替胶体金颗粒利用抗体、抗原在试纸条上的夹心反应，实现磁性纳米探针标记某抗原、或者菌体的检测技术，可以通过便携式的磁信号分析仪读取磁信号，该磁信号值与抗原的量有数量对应关系，因此，既可以直接通过磁信号的多少来进行抗原量的相对值比较，也可以先建立磁信号与抗原的标准曲线，从而定量样品中抗原的浓度实现抗原定量分析；而且整个层析膜的厚度上的磁信号都可以被读取，不存在信号的损失，因此磁性免疫层析既具有快速、简便、特异的优点，又克服胶体金试纸条方法难以定量且检测灵敏度低等缺点，可以满足日益多元化的POCT检测需求；还可多指标联合检测。

前列腺癌是男性生殖系常见的恶性肿瘤。近年来，在我国的发病率呈明显上升的趋势。据估计，50岁以上的男性当中，大约有40 %的人前列腺中都患有很小面积的癌症。大量临床数据表明，肿瘤的早期诊断和有效治疗可以大幅度提高患者治愈率和生存率，传统的检测方法已经无法有效面对目前人群中恶性肿瘤的高发病率、高死亡率的现状。同时对于肿瘤患者在治疗后的主要指标的监测也是指导医生用药及制定后续治疗方案的重要参考依据，因此，无论前列腺癌的早期诊断还是预后监测都需要一种简便、快速、定量、灵敏的新型血清学检测技术。利用磁性免疫层析这种兼具快速、简便，可准确定量待测指标，且无需大型仪器和专业操作人员的POCT检测技术和产品，适应国家推行的分级诊疗和在全国广大区、县、乡、镇一级的卫生医疗机构中推广应用的巨大前景。