[发明专利]一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液和核酸提取方法在审
| 申请号： | 201811000328.8 | 申请日： | 2018-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN109055490A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 高利飞;肖李亚;秦明明;高歌;胡伟锋;杜美;李振红;付光宇;吴学炜;苗拥军 | 申请（专利权）人： | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 反转录PCR 核酸洗脱 洗脱液 探针 引物 步骤合并 反转录酶 核酸提取 甘油 醋酸钾 醋酸锰 聚合酶 氯化锰 双功能 核酸 耐热 构建 耐受 洗脱 配制 自动化 检测 替代 | ||
【权利要求书】：
1.一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液，其特征在于：包括以下组分：2-100U双功能聚合酶，50-400μM dNTPs，50-400nM引物，20-400mM探针，2-10mM 氯化锰或醋酸锰，10-100mM Bicine/KOH，20-200mM醋酸钾，5-10%甘油；其pH≥8.0。
2.一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液，其特征在于：包括以下组分：2-100U耐热反转录酶mlv，50-400μM dNTPs，50-400nM引物，20-400mM探针， 10-100mM KCl，20-200mMTris-HCl；其pH≥8.0。
3.根据权利要求1或2所述的具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液，其特征在于：还包括PCR增强剂。
4.一种核酸检测方法，包括磁珠法核酸提取和PCR扩增，其特征在于：所述磁珠法核酸提取用的洗脱液和PCR扩增用的PCR反应液合成为权利要求1或2所述的反转录PCR反应液；所述洗脱步骤与后续PCR体系构建步骤合并为一个步骤。
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