[发明专利]一种食管癌的分子标志物及其用途有效
| 申请号： | 201811001875.8 | 申请日： | 2018-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN109022584B | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 葛晓松;刘晓媛;刘芬;王晓莉;高翔;茆勇;谢芬;周少丹 | 申请（专利权）人： | 江南大学附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/113;C12N5/10;C12N15/867;A61K31/7105;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 214062 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 食管癌 基因 分子标志物 高表达 治疗效果监测 表达抑制剂 食管癌细胞 食管癌诊断 食管癌组织 预后标志物 表达产物 表达抑制 基因功能 基因稳定 临床基因 应用潜力 有效信息 预后评估 低表达 细胞株 预后 提示 诊断 治疗 研究 | ||
1.FXR1基因、FXR1基因的表达产物中的至少一种在如下a1-a3至少一种中的用途：
a1，制备用于食管癌诊断的产品；
a2，制备用于食管癌预后评估的产品；
a3，制备用于食管癌疗效监测的产品。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述FXR1基因的表达产物包括FXR1 mRNA和/或FXR1蛋白。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述食管癌诊断包括食管癌远处转移诊断。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述食管癌为食管鳞癌。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述用于食管癌诊断的产品为引物组，所述引物组包括基于所述FXR1基因设计的引物。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述引物组包括如下引物：
FXR1-F，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
FXR1-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
7.根据权利要求1-6任一项所述的用途，其特征在于，所述治疗食管癌的药物为所述FXR1基因的表达抑制剂、含所述FXR1基因的表达抑制剂的载体、含所述FXR1基因的表达抑制剂的载体的重组细胞或假病毒颗粒中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述表达抑制剂包括siRNA和/或shRNA。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.8任一序列所示，
所述shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.9-SEQ ID NO.12任一序列所示。
10.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述载体包括核苷酸序列如SEQ IDNO.9-SEQ ID NO.12任一序列所示的shRNA。
11.一种稳定敲减FXR1基因的细胞株，其特征在于，所述细胞株是以食管癌细胞为目标细胞，通过权利要求7所述的假病毒颗粒感染，获得的稳定敲减FXR1基因的食管癌细胞。
12.一种构建权利要求11所述的稳定敲减FXR1基因的细胞株的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将核苷酸序列如SEQ ID NO.9-SEQ ID NO.12任一所示序列的shRNA片段连接至具有抗生素抗性的病毒载体，获得重组表达载体；
(2)利用重组表达载体和病毒包装质粒共转染包装细胞株，培养转染后细胞，收集培养基上清，浓缩后获得含有假病毒颗粒的病毒液；
(3)利用病毒液感染食管癌细胞，然后利用抗生素进行药物筛选，获得稳定敲减FXR1基因的细胞株。
13.根据权利要求12所述的构建方法，其特征在于，所述病毒载体为pHBLV-U6-Scramble-ZsGreen-Puro，所述病毒包装质粒包括pSPAX2和pMD2G。
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