[发明专利]一种氧化修饰的含氮碱基的检测方法在审

专利信息
申请号: 201811001972.7 申请日: 2018-08-30
公开(公告)号: CN109097460A 公开(公告)日: 2018-12-28
发明(设计)人: 李培峰;曾焕玉;高金宁;于忠杰 申请(专利权)人: 青岛大学
主分类号: C12Q1/6883 分类号: C12Q1/6883;C12Q1/6886;C12Q1/6869
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人: 李进
地址: 266000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 含氮碱基 修饰 检测 检测领域 脉冲间隔 发现
【权利要求书】:

1.一种氧化修饰的含氮碱基的检测方法,其特征在于,测定不同含氮碱基的IPD值,根据IPD值的不同得到氧化修饰的含氮碱基。

2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述含氮碱基包括腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶。

3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述含氮碱基为鸟嘌呤,所述氧化修饰的含氮碱基为8-oxoG。

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述IPD值为氧化修饰的含氮碱基的IPD值与相应的含氮碱基的IPD值的比值。

5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述比值大于1时为氧化修饰的含氮碱基;反之,则不是。

6.根据权利要求1-5任一项所述的检测方法,其特征在于,步骤如下:

将待检测物测序,得到的序列依次测定含氮碱基的IPD数值,得到第一列IPD数值;

将待检测物的序列按照未氧化的形式依次测定含氮碱基的IPD数值,得到第二列IPD数值;

相同位置上的所述第一列IPD数值与所述第二列IPD数值相比得到比值,根据比值的大小判断是否为氧化修饰的含氮碱基;

进一步地,所述氧化修饰的含氮碱基的位点的覆盖率达到25倍以上。

7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述测序采用SMRT测序技术进行。

8.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述待检测物构建基因文库,纯化,平末端连接接头,结合测序引物和酶进行测序。

9.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述测序在测序仪上进行,优选为PacBio RSII测序仪或PacBioSequel测序仪。

10.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,在步骤根据比值的大小判断是否为氧化修饰的含氮碱基中,氧化修饰的含氮碱基的目标比值通过软件进行筛选,所述软件并给出氧化修饰的含氮碱基的位置。

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