[发明专利]双重负载肽类及化疗药物的纳米复合载体及其制备与应用

权利要求书

1.双重负载肽类及化疗药物的纳米复合载体，其特征在于由介孔二氧化硅、树状高分子聚合物、肽类抗癌药物和化疗药物组成；所述纳米复合载体为球形，粒径为30～100nm；所述纳米复合载体由介孔二氧化硅和树状高分子聚合物复合而成，其连接方式为静电吸附和共价连接；所述介孔二氧化硅的颗粒尺寸为20～60nm，内部孔径为6～15nm，形貌为球形；所述介孔二氧化硅的表面有可修饰的反应官能团，所述可修饰的反应官能团为羧基；

所述树状高分子聚合物为聚酰胺-胺型树状高分子聚合物，树状高分子聚合物的端基功能团为氨基；

所述肽类抗癌药物为以Bcl-2为靶点的肽类药物，其氨基酸序列为FSRSLHSLL；

所述化疗药物为阿霉素抗癌药物；

所述肽类抗癌药物采用物理包埋的方式装载在介孔二氧化硅的孔内；所述树状高分子聚合物采用静电吸附和共价键的形式附于介孔二氧化硅表面；所述化疗药物采用物理包埋的方式装载在树状高分子聚合物的空腔内部。

2.如权利要求1所述双重负载肽类及化疗药物的纳米复合载体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)取2g十六烷基三甲基氯化铵和0.18g三乙醇胺于反应容器中，加入80ml、95℃去离子水溶解并搅拌1h；

2)向反应体系中缓慢滴加1.5ml正硅酸乙酯，继续搅拌2h后离心，用乙醇和水分别洗涤，得到含表面活性剂的介孔二氧化硅纳米粒；

3)取步骤2)所得的含表面活性剂的介孔二氧化硅纳米粒置于含1％氯化钠的甲醇溶液中，超声分散后于旋转混匀仪上洗涤12h，重复4次，经水洗涤后真空干燥，得到表面基团为羟基的介孔二氧化硅纳米粒；

4)取步骤3)中所合成的介孔二氧化硅50mg超声分散于无水乙醇溶液，置于85℃油浴冷凝回流4h，加入3-氨丙基三乙氧基硅烷200μl，稳定回流过夜，用乙醇洗去未反应物质，得到氨基修饰的介孔二氧化硅纳米粒；

5)取丁二酸酐0.1g于反应容器中，加入N，N-二甲基甲酰胺2ml和超纯水5ml混合溶液超声溶解；取步骤4)中所合成的氨基修饰的介孔二氧化硅纳米粒10mg加入反应体系中，然后加入三乙醇胺100μl，室温搅拌过夜；用去离子水洗去未反应物质，得到羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒；

6)取步骤5)中所制备得到的羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒10mg，与有或无荧光标记的肽类药物混合后低温搅拌24h，洗涤得到包载小肽的介孔二氧化硅纳米粒；

7)取步骤6)中的载药介孔二氧化硅纳米粒10mg，加入聚酰胺-胺型树状高分子聚合物，搅拌12h后洗涤，得到包载肽类药物的介孔二氧化硅-树状高分子聚合物复合纳米载体；

8)取步骤7)得到的负载肽类抗癌药物的介孔二氧化硅-树状高分子聚合物复合纳米载体与化疗药物混合后搅拌24h，洗涤得同时负载肽类抗癌药物和化疗药物的双重载药介孔二氧化硅-树状高分子复合纳米载体。

3.如权利要求1所述双重负载肽类及化疗药物的纳米复合载体在制备治疗癌症药物中应用，所述治疗癌症药物为以Bcl-2为靶点的药物。