[发明专利]一种止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱建立方法

说明书

一种止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱建立方法，涉及指纹图谱建立方法技术领域，具体方法包含以下步骤：步骤一、供试品的制备，对照品溶液的制备，测定方法，吸取对照品溶液和供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，将供试品和混合对照品溶液的检测结果导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件，经数据匹配，生成对照指纹图谱。本发明所提供的方法所建立的止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱，能有效的表征止嗽立效丸的质量，有利于全面监控药物的质量。且本发明的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的优点。

技术领域

本发明涉及一种止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱建立方法，具体为指纹图谱检测建立方法技术领域。

背景技术

止嗽立效丸在中医和西医临床上均应用广泛，为国家四类中药新药，服用方便，安全，释放快，吸收快，起效快。对于所有因风寒而引起的呼吸系统疾病，风寒咳嗽、咯血、痰多、胸闷、胸痛、喘息等证状，均有明显的治疗效果。是治疗风寒咳嗽的理想用药。

中药指纹图谱是国际公认的控制中药质量的一种研究模式和技术平台，它通过分析中药有效成分和无效成分的种类和含量分布信息，使中药的研究方法和质量分析手段由针对一个或者少数几个活性成分的分析，发展为对整个中药化学指纹图谱的综合分析，具有普适性和经济性。中药指纹图谱反映了中药多成分协同作用、多层次复杂性及整体性。

止嗽立效丸组方中共有多种中药药材，必须对它的物质群整体予以控制。所以，除了“微观分析”外，还应该用某种“宏观分析”方法，从整体上有效的表征中药质量。所以建立一种止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱方法势在必行。

发明内容

本发明的目的在于提供一种止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱建立方法。

本发明止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱建立方法，具体方法包含以下步骤：步骤一、供试品的制备，准确称取止嗽立效丸药材粉末0.50g，置具塞锥形瓶中，准确加入80％的甲醇水溶液10ml，其中甲醇水溶液中含0.5％磷酸，盖塞，称重，超声提取30分钟，冷却，称重，以提取溶剂补足失重，过滤，续滤液经0.22μm微孔滤膜过滤，续滤液即为供试品；

步骤二、对照品溶液的制备，准确称取麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、罂粟碱和甘草酸单铵盐对照品约1.0mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，进HPLC之前经0.22μm微孔滤膜过滤；

步骤三、测定方法，吸取对照品溶液和供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，将供试品和混合对照品溶液的检测结果导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件，经数据匹配，生成对照指纹图谱。

作为优选，所述的高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；以乙腈为流动相A，以0.1％的磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为0-24分钟，210nm；24-42分钟，250nm；42-78分钟，210nm；柱温为30℃；流速为1.0ml/分钟；进样量为15μl，理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于20000。

作为优选，所述的梯度洗脱方式为

与现有技术相比，本发明的有益效果如下：本发明所提供的方法所建立的止嗽立效丸高效液相色谱指纹图谱，能有效的表征止嗽立效丸的质量，有利于全面监控药物的质量。且本发明的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的优点。

附图说明

图1为实施例中12批样品批号图；

图2为实施例中供试品2小时后色谱图；

图3为实施例中12批样品匹配后HPLC色谱图；

图4为实施例中12批样品共有峰面积匹配结果图；