[发明专利]一种二氢异吲哚-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶酮化合物、其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一类一种式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，其可以作为新一代的Wee1选择性抑制剂，相对于现有的Wee1抑制剂，本发明化合物对于Wee1激酶有更好的选择性，从而更加安全和更高的治疗指数，也有更好的血脑屏障渗透性，因而具有更好的安全性和更广的适应范围，应用于各种肿瘤的治疗，包括脑瘤的治疗。

技术领域

本发明涉及一类二氢异吲哚-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶酮化合物及其制备方法、包含所述化合物的药物组合物，用于制备治疗癌症，癌前综合症的药物或辅助性药物。

发明背景

细胞周期检查点是细胞周期进程中的一套保证DNA复制和染色体分配质量的检查机制。当细胞周期进程中出现异常事件，如DNA损伤或DNA复制受阻时，这类调节机制就被激活，及时地中断细胞周期的进行，待细胞修复或排除故障后，细胞周期才能恢复运转。细胞周期调控系统的核心成分是周期蛋白依赖性激酶(CDKs)与周期蛋白(Cyclins)结合形成的CDKs/Cyclins复合物，能促进细胞进入增殖周期。Cdc2/CyclinB复合体的快速激活，使细胞完成从G2期到M期的转变，而这一快速的转变正是在Wee1和Cdc25等蛋白激酶的调节下进行。

Wee1是一种酪氨酸激酶，它是G2-M细胞周期检查点的一个关键组成部分，可以阻止细胞DNA损伤进入有丝分裂。在细胞有丝分裂前，CDK1通过Wee1磷酸化其酪氨酸15而维持在无活性状态，然后CDK1在苏氨酸14被髓磷脂转录因子(MYT1)磷酸化，因此，WEE1作为在G2-M转变中进入有丝分裂的负调节器，通过细胞质中激活的CDK1与细胞周期蛋白B复合物来保护细胞核。当它超磷酸化时,WEE1的转录合成和活性在S期和G2期增加，在M期降低。当细胞接近G2-M转换时，在没有实质性DNA损伤的情况下，PLK1将WEE1磷酸化，然后通过泛素连接酶的复合物将WEE1降解。PLK1还磷酸化和激活蛋白磷酸酶细胞分裂周期25同系物(CDC25)，然后通过去磷酸化激活CDK1。激活的CDK1则具有结合细胞周期蛋白B的能力，促进细胞进入有丝分裂。

在DNA损伤的情况下，ATM蛋白激酶或ATR蛋白激酶途径选择性地优先激活。Y由于电离辐射和药物引起双链DNA断裂则ATM被激活。它磷酸化和激活CHK2，CHK2使CDC25C的216处丝氨酸磷酸化，促进与14-3-3s蛋白质结合，细胞核输出和CDC25C的细胞质隔离。CDC25C磷酸酶活性的抑制导致CDK1/cyclinB复合体的抑制性磷酸化，使CDK1保持无活性状态并阻止细胞进入有丝分裂。相反，ATR在广泛导致单链DNA断裂的基因毒性应激中被激活。ATR磷酸化并激活CHK1，然后CHK1磷酸化WEE1和CDC25C，由此激活WEE1激酶活性和灭活CDC25C磷酸酶活性。然后，WEE1在CDK1-细胞周期蛋白B复合物的酪氨酸15上磷酸化，并灭活，导致G2中的细胞周期停滞，从而允许有时间进行DNA修复。

G1检查点在许多癌症中失调，这损害了细胞在复制之前停止细胞周期以修复DNA损伤的能力(S期)。这为癌细胞提供了一种积累突变的方法，并增加了有利于增殖的不规则性。因此，癌细胞依赖于G2-M检查点来防止过度的DNA损伤，在那里通过有丝分裂的灾难规避细胞凋亡。这表明废除G2-M检查点将选择性地影响肿瘤细胞，而对具有G1和G2-M检查点功能的正常细胞仅有有限的影响。因此，WEE1激酶活性的抑制和G2-M检查点的废除以促使癌细胞进入非计划的有丝分裂并最终通过有丝分裂灾难发生细胞死亡是很有吸引力的癌症治疗策略。

除了作为G2阻滞门控作用之外，WEE1在细胞分裂的调控中也起关键作用，并且通过CDK1和CDK2上保守的酪氨酸残基的抑制性磷酸化，它控制在S期期间进入有丝分裂和DNA复制。还有证据表明WEE1在协调细胞大小和细胞周期进程的有丝分裂检查点中起作用。此外，最近的研究暗示WEE1稳定复制叉和同源重组修复。WEE1的表观遗传学功能也已被描述，其中WEE1使组蛋白H2B在组蛋白基因簇上游的核小体中磷酸化，抑制S期晚期的组蛋白转录。总之，这些发现支持了WEE1在DNA修复和维持基因组完整性方面的重要作用，WEE1可能是癌症治疗中可行的治疗靶点。