[发明专利]一种具有抗炎症性肠病活性的羧甲基茯苓多糖及其制备与应用

权利要求书

1. 一种羧甲基茯苓多糖CMP33的制备方法，其特征是所述多糖是利用DEAE-52纤维素层析柱、Sephadex-G200+Sephadex-G150层析柱联用，对现有的羧甲基茯苓粗多糖进行分离纯化，以0.1 mol/L NaCl溶液为洗脱液洗脱得到的羧甲基茯苓多糖CMP33。

2. 如权利要求1 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP44的制备方法，其特征在于所述现有羧甲基茯苓粗多糖由中国专利文献CN 105348407 A公开的羧甲基茯苓多糖的制备工艺制得。

3. 如权利要求1 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33的制备方法，其特征是所述多糖CMP33的单糖组成为D-葡萄糖，所述多糖分子量为15.23×10⁴ Da，结构为（1→3）-β-D-葡聚糖，含有（1→6）和（1→2）糖苷键，具有三螺旋结构。

4.由权利要求1~3任一项所述制备方法制得一种羧甲基茯苓多糖CMP33。

5.如权利要求4 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征在于CMP33对自由基DPPH•、ABTS+、•OH的EC50值分别为3.62 mg/mL、3.55 mg/mL、2.31 mg/mL。

6. 如权利要求1 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33在31.25-1000 μg/mL浓度范围内对结肠癌细胞HT-29、肝癌细胞HepG-2、乳腺癌细胞MCF-7、胃癌细胞SGC-7901以及肺癌细胞A549细胞增殖有抑制作用，对应的IC50值分别为113.3μg/mL、282.7μg/mL、385.8μg/mL、79.56μg/mL、204.1μg/mL。

7. 如权利要求1 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33 能显著抑制脂多糖LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7释放一氧化氮（NO）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-1β（IL-1β），在31.25-1000 μg/mL浓度范围内，对LPS诱导的NO、IL-6、TNF-α及IL-1β生成的抑制率分别达到52.31%、47.96%、79.68%及51.80%，具有抗炎活性。

8. 如权利要求1 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33无LPS诱导时可激活RAW264.7细胞分泌NO、IL-6、TNF-α及IL-1β，具有免疫调节作用。

9. 如权利要求1 所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33，其特征是所述多糖CMP33灌胃给药处理改善三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的炎症性肠病（IBD）小鼠的宏观表现，降低小鼠结肠病理切片组织学评分，降低小鼠结肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性和丙二醛（MDA）的含量。

10.权利要求4所述的一种羧甲基茯苓多糖CMP33的应用，其特征是所述多糖CMP33在制备功能食品与生物制药中的应用，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、免疫调节及抗炎症性肠病（IBD）的活性。