[发明专利]一种重塑复合生物羊膜的制备方法

说明书

本发明涉及医用材料制备技术领域，具体涉及一种重塑复合生物羊膜的制备方法。本发明以活性干酵母为原料得到蛋白酶，将酶解液、亚麻油酸剪切，同时添加抗坏血酸得到生物肽氧化剂，原花青素具有非常强的体内活性，能保护人体细胞组织免受自由基的氧化损伤，还具有加强和保护人体活性组织、稳定细胞膜以及抗酶活性等生物特性，本发明采用瓜尔胶与羊膜组合，羊膜中的活性蛋白的巯基受到瓜尔胶的物理屏障的保护，减少了活性基团的氧化，瓜尔胶的流变性能使不可溶的羊膜胶原成分长期地悬浮，瓜尔胶有利于羊膜低温粉碎和常温保存，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及医用材料制备技术领域，具体涉及一种重塑复合生物羊膜的制备方法。

背景技术

组织粘连是结缔组织纤维带与相邻的组织或器官结合在一起而形成的异常结构，可引起各种术后并发症：例如，肌腱修复术后粘连，严重的影响手术部位功能的恢复，甚至会造成局部功能的丧失。

羊膜是指人类胎盘的基底膜层，也是胎盘的最内层，光滑且具有一定的弹性，厚度约为0.02至0.5mm。羊膜是无血管、无细胞结构的胶原组织层，富含IV、V型胶原、碱性成纤维细胞生长因子、干细胞生长因子，易使上皮细胞移行长入、促进上皮的分化、增殖，在上皮创伤愈合中起重要作用。羊膜含有丰富的胶原蛋白、层粘连蛋白、纤维粘连蛋白等蛋白成分，为创伤愈合提供细胞生长的网架结构同时，也促进人体细胞的分化、分裂，从而达到快速愈合的效果。另外，羊膜中不含有血管、神经、淋巴等组织，使生物羊膜产品在临床使用后几乎不发生免疫排斥反应。此外还有来源广泛、保存简便、手术操作简单等特点，适用于烧伤、普外、眼科、内分泌等科室各类常规手术当中。

羊膜具有5层结构，分别是上皮细胞层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层。目前，羊膜主要用于外科手术中，其中包括：

（1）眼睛表面疾病如角膜修复、先天性青光眼、角膜溃疡等；

（2）修补鼓膜损伤；

（3）用于疝修补；

（4）外科手术后预防粘连；

（5）烧伤后表面覆盖，用作生物敷料。

传统制备得到的羊膜材料比较薄、易卷曲、黏附性较差、使用时易滑动脱落。为了克服上述缺点，目前采用交联技术制备复合生物衍生羊膜以改善其可操作性，但处理时使用了氯仿、甲醇、戊二醛等多种有机试剂，处理强度大，经过脱脂等多个步骤后对羊膜的天然结构破坏很大，造成胶原束排列不规则，胶原纤维断裂，同时大量的生物活性因子失活，试剂残留风险高。

根据临床报道，由于羊膜细胞的存在，在眼科，羊膜植片可能会发生植片排斥反应、植片脱落、移位溶解、感染等并发症，其安全性存在一定的风险。为了降低产品的的免疫原性，就需要对羊膜进行脱细胞处理。目前对于羊膜的处理方法大多为临时剥离处理的新鲜羊膜，或者经过预处理的深低温保存羊膜，但两者均不能做到随取随用。还有一种技术是将羊膜预处理后真空冷冻干燥，灭菌包装储存，该种方式能够做到随取随用，延长保存期到1～3年。目前对于羊膜的处理方法容易使羊膜损失大量天然胶原及活性因子，对羊膜临床使用效果造成了极为不利的影响，同时存在细胞残留、机械性能不足以及降解周期较短等缺陷，限制了其临床应用范围。而且处理过的羊膜材料，极少能完全取出细胞等抗原成分，因此仍具有一定的抗原性，有可能在使用时引发炎症。此外，单层的羊膜或羊膜材料较薄，机械强度较差，易撕裂，手术中操作困难，不利于临床使用和研究。

因此，能够研制出一种能够解决上述问题的生物羊膜具有重要意义。

发明内容

本发明主要解决的技术问题，针对目前生物羊膜在反复冻融、干燥和脱细胞等工艺处理过程中，羊膜中大量天然胶原及活性因子易被氧化，并且有机化学试剂会破坏胶原蛋白、胶原纤维等成分，造成生物羊膜生物性功能不能满足临床要求的缺陷，提供了一种重塑复合生物羊膜的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：