[发明专利]一种从空气中筛选产葡萄糖氧化酶菌种的方法在审
| 申请号： | 201811015932.8 | 申请日： | 2018-09-01 |
| 公开（公告）号： | CN109097435A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 陈永发;周慧 | 申请（专利权）人： | 长沙理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/32 | 分类号： | C12Q1/32;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410114 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 筛选 葡萄糖氧化酶 菌种 初筛培养基 培养基配方 菌种筛选 目标菌种 无菌操作 传统的 灭菌 初筛 水样 土样 优化 | ||
1.一种从空气中筛选产葡萄糖氧化酶菌种的方法，其特征在于包括如下步骤：
1)将含筛选培养基的固体平板直接暴露在空气中静置5-10天，待平板中出现产生蓝色圈菌苔；
2）在无菌条件下，挑取产生蓝色圈的菌苔，于含有划线分离培养基的固体平板中划线培养，待平板中出现产生蓝色圈的单菌落；
3）在无菌条件下，挑取产生蓝色圈的单菌落，菌种经活化后，制备种子液，种子液接种于液体发酵培养基，进行摇瓶发酵；
4) 收获发酵液，离心，采用滴定法测酶活，完成整个筛选过程。
2.根据权利要求1所述的空气中筛选产葡萄糖氧化酶菌种的方法，其特征在于步骤1）不需无菌操作，且筛选培养基组成为：葡萄糖40-100g/L，碳酸钙3.5g/L、可溶性淀粉10g/L、碘化钾1.7g/L、琼脂15-20g/L，pH自然，溶剂为自来水，培养基无需灭菌。
3.根据权利要求1所述的空气中筛选产葡萄糖氧化酶菌种的方法，其特征在于步骤2）中划线分离培养基组成为：葡萄糖80g/L、蛋白胨3g/L、硫酸铵0.4g/L、磷酸二氢钾0.19g/L、硫酸镁0.16g/L、碳酸钙3.5g/L、可溶性淀粉10g/L、碘化钾1.7g/L、琼脂粉15-20g/L，溶剂为去离子水，pH5-6，121℃灭菌25min,培养温度为25-28℃，培养时间为48-72小时。
4.根据权利要求1所述的空气中筛选产葡萄糖氧化酶菌种的方法，其特征在于步骤3）中液体发酵培养基组成为：葡萄糖80g/L、蛋白胨3g/L、硫酸铵0.4g/L、磷酸二氢钾0.19g/L、硫酸镁0.16g/L、碳酸钙3.5g/L、溶剂为去离子水，pH为5-6，121℃灭菌25min，接种量5%-10%,培养温度为28℃，摇瓶转速150-200rpm，培养时间为48-72小时。
5.根据权利要求1所述的空气中筛选产葡萄糖氧化酶菌种的方法，其特征在于步骤4）中离心管为2ml eppendorf离心管，转数5000-8000rpm，时间5-10min。
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