[发明专利]一种检测mircoRNA的纳米探针的制备方法有效
申请号: | 201811016661.8 | 申请日: | 2018-09-03 |
公开(公告)号: | CN109097441B | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
发明(设计)人: | 王怀松;苏彦龙;王丹丹;陈诺;赵雅萱;郝亚波;魏纪平 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京卓特专利代理事务所(普通合伙) 11572 | 代理人: | 段宇 |
地址: | 211198 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 mircorna 纳米 探针 制备 方法 | ||
1.一种检测mircoRNA的纳米Zn2Ph2Da探针的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
步骤1,纳米Zn2Ph2Da材料制备;
步骤2,荧光标记核酸适体吸附纳米Zn2Ph2Da;
步骤1包括如下步骤:
步骤1.1,称取ZnAc2·2H2O、配体2,2’-二硫代水杨酸和辅助配体1,10-菲啰啉加入10-100mL极性有机溶剂中;
步骤1.2,在步骤1.1的混合溶液中加入0.1-0.5mL氢氧化钠或氢氧化钾溶液,所述氢氧化钠或氢氧化钾溶液浓度为0.01-0.05g/mL,混合均匀;
步骤1.3,步骤1.2中的混合溶液转移至反应釜的聚四氟乙烯内胆中,封装反应釜,放入烘箱中,以150-220℃加热,反应20-70h;
步骤1.4,将步骤1.3反应釜降温至室温,得到Zn2Ph2Da晶体;
步骤1.5,将步骤1.4中得到的Zn2Ph2Da晶体1-10mg,加入1-10mL无水乙醇中,利用细胞破碎仪超声粉碎10-60min后,离心,得到纳米Zn2Ph2Da;
步骤2包括如下步骤:
步骤2.1,将0.010-0.150mg纳米Zn2Ph2Da分散于0.5-1.0mL浓度为0.01M的PBS中,pH7.4;
步骤2.2,加入0.5-10μL TAMRA标记浓度为10-50μM的核酸适配体,室温下搅拌反应0.1-1h,在5000-12000rpm条件下离心,得到纳米Zn2Ph2Da探针;
2,2’-二硫代水杨酸、1,10-菲啰啉和Zn离子的摩尔比例为1:2:2。
2.根据权利要求1所述的一种检测mircoRNA的纳米Zn2Ph2Da探针的制备方法,其特征在于:所述的Zn2Ph2Da晶体形貌为长方体。
3.根据权利要求2所述的一种检测mircoRNA的纳米Zn2Ph2Da探针的制备方法,其特征在于:ZnAc2·2H2O的摩尔数为0.05-0.50mmol。
4.根据权利要求3所述的一种检测mircoRNA的纳米Zn2Ph2Da探针的制备方法,其特征在于:配体2,2’-二硫代水杨酸的摩尔数0.05-0.60mmol。
5.根据权利要求4所述的一种检测mircoRNA的纳米Zn2Ph2Da探针的制备方法,其特征在于:辅助配体1,10-菲啰啉的摩尔数为0.05-0.60mmol。
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