[发明专利]一种检测mircoRNA的纳米探针的制备方法

说明书

本发明涉及一种可检测mircoRNA的纳米Zn₂Ph₂Da探针的制备方法，包括如下步骤：步骤1，纳米Zn₂Ph₂Da材料制备；步骤2，荧光标记核酸适体吸附纳米Zn₂Ph₂Da。本发明的有益效果在于，首先，本发明纳米Zn₂Ph₂Da探针的制备方法简单，制备过程不需要有毒有机溶剂，不需要严格的合成条件；其次，该纳米Zn₂Ph₂Da探针稳定性好，使用方便；此外，该纳米Zn₂Ph₂Da探针具有良好的核酸适配体结合能力，对mircoRNA有良好的选择性，其他生物分子及有机分子对其荧光信号无明显影响；最后，本发明方法为共性检测方法，适用于各种mircoRNA的选择性识别和检测。

技术领域

本发明属于microRNA荧光检测的技术领域，具体涉及一种检测 mircoRNA的纳米Zn₂Ph₂Da探针的制备方法。

背景技术

MicroRNA是一类约18～25个碱基的单链小分子RNA，可通过各种途径参与生物体内发育、器官形成、造血过程、病毒防御、脂肪代谢等生理活动，其反常表达与癌症的引发、肿瘤的生成、肿瘤治疗的应激反应有关，是癌症处理的重要标志物和治疗靶分子。因此，实现对microRNA的高灵敏检测具有重要的科学意义。

目前，检测mircoRNA的方法大致分为Northern印迹法、微阵列芯片技术、RT-PCR技术、核酸杂交扩增检测、纳米检测等。其中，基于纳米材料的mircoRNA荧光检测方法不仅操作简单，而且具有高灵敏度、高选择性的特点。这些纳米材料(如金纳米颗粒、石墨烯和二硫化钼等)具有很好的荧光猝灭能力，并能吸附荧光标记的核酸适配体，当加入与该适配体完全匹配的目标mircoRNA后，杂交形成结构稳定的双螺旋DNA结构，并从该纳米材料表面脱离，体系的荧光信号恢复。根据体系荧光强度的变化，可实现对mircoRNA的定量检测。

纳米级金属有机配位材料可作为一种新型的传感材料，近年来在气体存储、催化和生物分子传感领域展现出一定潜力。本发明以2,2’-二硫代水杨酸和1,10-菲啰啉为配体，制备了新型的含锌离子的金属有机配位材料(Zn₂Ph₂Da)。该材料通过π-π键相互作用形成稳定的晶体结构。在有机相中，通过超声粉碎的方法，可以得到Zn₂Ph₂Da的纳米级颗粒。纳米 Zn₂Ph₂Da可吸附荧光分子标记的核酸适配体，通过荧光强度的变化，对目标mircoRNA进行高灵敏、高选择性检测。

发明内容

1.要解决的技术问题

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种检测mircoRNA的纳米Zn₂Ph₂Da探针的制备方法，简化制备步骤，提高检测的稳定性，同时提高对mircoRNA的选择性。

2.技术方案

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种检测mircoRNA的纳米Zn₂Ph₂Da探针的制备方法，包括如下步骤：

步骤1，纳米Zn₂Ph₂Da材料制备；

步骤2，荧光标记核酸适体吸附纳米Zn₂Ph₂Da。

优选的是，步骤1包括如下步骤：