[发明专利]白花蛇舌草多糖在制备肠道菌群调节药物中的应用

说明书

本发明涉及肠道菌群调节药物领域，具体涉及白花蛇舌草多糖在制备肠道菌群调节药物中的应用。本发明通过研究发现，白花蛇舌草多糖干预后的荷瘤大鼠对黄酮苷类成分的吸收作用出现了提高，灌胃一段时间后的荷瘤大鼠肠道菌群在门、纲、目、科、属、种层面的丰度发生了变化，证实了白花蛇舌草多糖对疾病状态的大鼠肠道菌群具有切实的调节作用，可用于制备针对肿瘤患者的肠道菌群调节药物，也可与黄酮苷类药物进行联合用药，提高抗肿瘤药物的药效，为黄酮苷类抗肿瘤药物的进一步开发做出了贡献。

技术领域

本发明涉及肠道菌群调节药物领域，具体涉及白花蛇舌草多糖提取物在制备肠道菌群调节药物及在制备黄酮类抗肿瘤药物辅助药物方面的应用。

背景技术

白花蛇舌草为茜草科植物耳草属的一年生披散草本植物，《中华人民共和国药典》(2015版)一部附录中描述其为茜草科植物白花蛇舌Oldenlandia diffusa (Willd.)Roxb的干燥全草。其味苦、甘，性寒，归心、肝、脾经，具有清热解毒，利尿消肿，抗癌止痛的功效。

黄酮类成分是白花蛇舌草中含量较高的有效提取部位，研究认为其抗肿瘤作用机制与干扰肿瘤细胞能量代谢，诱导肿瘤细胞凋亡等有关。周忆新等研究表明白花蛇舌草总黄酮对人肝癌细胞HepG-2有抑制增殖作用。杨娴等研究表明FOD (白花蛇舌草总黄酮)能有效抑制黑色素瘤A375和B16细胞增殖，诱导细胞凋亡。张硕等采用MTT法表明FOD在体外、体内均具有抑制肝癌细胞的作用。邓雪清等研究表明FOD对鼻咽癌细胞株CNE1具有抑制增殖作用，其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。除抗肿瘤作用之外，白花蛇舌草黄酮抗氧化功能机免疫功能等，李明通过体外实验研究表明白花蛇舌草多糖有良好的清除氧自由基和羟自由基的能力而具有体外抗氧化活性。王转子等研究表明白花蛇舌草多糖通过提高SOD活力和对负氧自由基的清除作用及抗脂质过氧化作用来抵抗衰老。蒋剑平等通过DPPH清除率、总的抗氧化活性和还原能力测定等体外抗氧化试验表明白花蛇舌草多糖对体外有较强的抗氧化能力，对自由基有较好的清除作用。王宇翎等通过实验表明白花蛇舌草总黄酮有增强机体特异性免疫功能和非特异性免疫功能的作用。杨培民研究认为多糖成分可提供肠道菌群所需糖源，恢复肠道益生菌数量和活力，可增强机体的全身免疫反应，提高机体免疫系统功能。

黄酮类化合物对癌症、心脏病、中风等疾病的治疗起着十分重要的作用。黄酮类物质常与糖结合成苷类，仅有小部分以游离形式存在，其口服生物利用度低，在肠道内滞留时间长，绝大多数需经肠道细菌酶分解为次生苷、苷元或其他代谢产物而发挥疗效。

临床上白花蛇舌草主要用于抗肿瘤、抗菌消炎作用，其多糖和黄酮类物质均为发挥药效作用的活性成分，通过集中探索二者单体成分的研究成果，发现其在药效发挥上具有不同程度的一致性，而大量研究只针对白花蛇舌草黄酮和多糖的单体成分，对二者间是否存在相互作用的报导寥寥无几。

发明内容

针对现有技术中的问题，本发明针对白花蛇舌草多糖与白黄蛇舌草黄酮提取物之间的作用关系进行了研究。通过药代动力学实验表明，白花蛇舌草多糖对荷瘤大鼠的肠道菌群具有调节作用，能够帮助疾病状态的大鼠增强对黄酮苷类物质的吸收，可用于制备肠道菌群调节药物或黄酮苷类抗肿瘤药物的辅助用药。为了实现以上目的，本发明提供以下方案：

本发明的第一方面，提供一种白花蛇舌草多糖的提取方法，步骤如下：

(1)将白花蛇舌草加水浸泡一段时间后，加热至一定温度回流提取，将提取液合并过滤离心，取上清液减压浓缩。

(2)向上清液中加入乙醇使溶液中的醇达到一定浓度，静置一段时间离心将滤液浓缩，继续加醇使滤液中的醇含量升高，静置后离心取沉淀部分，经冷冻干燥得到白花蛇舌草多糖粗品。

(3)向白花蛇舌草多糖粗品中加入鞣酸沉淀后再加入活性炭升温脱色，以除去蛋白质和色素等杂质。通过超滤技术截留一定分子量的多糖，然后采用 DEAE-32离子交换层析和Superdex 30凝胶层析去除无机盐和小分子糖等杂质，制得白花蛇舌草多糖。