[发明专利]一种顺反异构西红花酸的分离方法

说明书

本发明涉及天然植物活性成分提取分离技术领域，具体涉及一种顺反异构西红花酸的分离方法。西红花酸(crocetin)属类胡萝卜素类化合物，具有很强的抗氧化活性、保护心血管、抑制皮肤癌[1]等作用，在医药、护肤品具有潜在的应用价值。西红花酸及其糖苷主要存在于栀子果和西红花。栀子果价值低廉来源丰富，可为西红花酸提供丰富的原料来源，但存在顺反异构体，本发明提供了一种顺反异构西红花酸的分离方法，该方法利用顺反异构西红花酸与钙离子的结合能力不同，全反式西红花酸易与Ca2+离子形成规整的分子复合物，即易发生结晶(沉淀)，而顺式西红花酸由于不能与Ca2+形成规整的分子复合物，即不易与Ca2+形成沉淀，据此可将两者有效分离。

技术领域

本发明属于天然药物化学技术领域，涉及天然植物活性成分提取分离技术领域，具体涉及一种顺反异构西红花酸的分离方法。

背景技术

西红花酸(crocetin)属类胡萝卜素类化合物，一般与龙胆二糖苷(即西红花苷，crocin)的形式存在植物中，主要分布于西红花和栀子。西红花酸具有很强的抗氧化活性、保护心血管、抑制皮肤癌[1]等作用，在医药、护肤品具有潜在的应用价值。Ohba T[2]研究UVA对人皮肤成纤维细胞的作用时发现，西红花酸可以保护人皮肤成纤维细胞免受UVA的伤害，其机理是西红花酸可以减少有UVA引起的活性氧的产生。Yinghua Song[3]研究西红花酸对由博来霉素引起的小鼠硬皮病的影响时，发现西红花酸可以逆转皮肤纤维化。

西红花苷及西红花酸在西红花中含量较高，但西红花价格昂贵，从中制备西红花酸成本很高。栀子果价值低廉来源丰富，可为西红花酸提供丰富的原料来源。研究发现，栀子果中的西红花苷的苷元即西红花酸存在两种结构，即全反式(E-crocetin)和13-顺式(Z-crocetin)[4]。一般由栀子黄(主要成分西红花苷)经碱解酸沉可制备西红花酸粗品，一般纯度在50％-80％不等，很难将二者分离，制得高纯度西红花酸。专利CN201310066851.1采用吡啶作为溶剂，重结晶制备高纯度反式西红花酸，但该方法所用吡啶有剧毒。专利CN201410666585.0先用硅胶柱对栀子黄进行纯化制得高纯度西红花苷，在以高纯度西红花苷为原料制备西红花酸，最后经N,N-二甲基甲酰胺重结晶制得高纯度西红花酸。该工艺较为复杂，且所用的硅胶柱层析难以工业化。专利CN201610292072.7采用无水乙醇重结晶法将西红花酸纯度由55.5％提高至96％。实际操作中发现，西红花酸难溶于乙醇，因此实际所需的乙醇消耗量很大。专利201710227023.X采用高浓度的碱溶液重结晶制得高纯度的西红花酸，按照实施例2估算，将10.0g纯度为10.6％西红花酸重结晶提纯至99.4％(0.93g)，需要消耗100g以上的氢氧化钾，该方法碱消耗非常大，易产生大量碱性废液。

发明内容

本发明的目的在于克服背景技术中存在的上述缺陷或问题，提供一种顺反异构西红花酸的分离方法。

为达成上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种顺反异构西红花酸的分离方法，利用顺反异构西红花酸与钙离子的结合能力不同，用钙离子先将全反式西红花酸结晶出来，再酸化得到13-顺式西红花酸。

进一步，该方法所述钙离子来源于可溶性钙盐溶液，如醋酸钙、氯化钙、柠檬酸钙，其质量浓度为1％～20％。

进一步，该方法包括以下步骤：

(1)将西红花酸粗品及水于烧杯中，用碱调节pH为7-14，加热促使西红花酸粗品溶解，趁热滤弃不容物；

(2)往滤液中缓慢滴入钙离子，此时西红花酸钙盐析出，保温使之结晶完全；

(3)过滤；

(4)滤渣用乙醇洗淋，再用酸酸化，保温，过滤，纯水洗淋，滤渣真空干燥得全反式西红花酸；

(5)往(3)滤液中添加酸酸化，保温，过滤，纯水洗淋，滤渣真空干燥得顺式西红花酸。