[发明专利]一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒及制备方法

权利要求书

1.一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1的各组分及浓度包括：

所述试剂R2的各组分及浓度包括：

2.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述试剂R1和R2中的第一缓冲液A、第一缓冲液B、第二缓冲液A以及第二缓冲液B均为PBS缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸缓液中的一种或几种的组合。

3.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述试剂R1中的防腐剂为叠氮钠、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞中的一种或几种的组合。

4.根据权利要求2所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述第一缓冲液A和第二缓冲液A为二水合磷酸二氢钠，第一缓冲液B和第二缓冲液B为十二水合磷酸氢二钠。

5.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述试剂R2中稳定剂为牛血清白蛋白、酪蛋白、明胶、甘露醇中的一种或几种的组合。

6.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述试剂R2中的助悬剂为葡萄糖、D-海藻糖、甘露醇、蔗糖、麦芽糖、乳糖、丙三醇中的一种或几种的组合。

7.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述试剂R2中的防腐剂为叠氮钠、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞等中的一种。

8.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述R1、R2试剂pH在6.00-8.50。

9.根据权利要求1所述的一种测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒，其特征在于：所述生物素结合游离轻链Kappa抗体比例为1:1-4:1之间，链霉亲和素结合生物素-羊抗人Kappa游离轻链抗体比例为0.5:1-4:1之间。

10.如权利要求1-9任一测定游离轻链Kappa浓度的试剂盒的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，

A)、试剂R1制备；

在配液罐中先加入适量纯化水于磁力搅拌器上，调节搅拌子至中档转速，使溶液保持中速转动状态，以0.8-3.2g/L标准，边搅拌边投入第一缓冲液A，以8.75-24.31g/L的标准投入第一缓冲液B，搅拌5-30分钟至物料完全溶解，溶液清澈透明配液罐底部无沉淀后，调节pH值到6.00-8.50之间，之后以5.8-20.0g/L标准，投入氯化钠，待物料完全溶解后再按照上述投料方式分别以40-120g/L、0.8％-2.0％的标准，依次投入PEG 6000、Proclin-950,投料完成后，继续搅拌5-30分钟至全部物料完全溶解，溶液清澈透明，配液罐底部无沉淀，定容至最终体积；

溶解完的配液按照微孔过滤器操作规程，通过微孔滤膜过滤，过滤后的溶液存放在成品罐中，进行标识；

B)、试剂R2制备；

在配液罐中先加入适量纯化水于磁力搅拌器上，打开磁力搅拌器电源开关，调节搅拌子至中档转速，使溶液保持中速转动状态，以0.5-2.8g/L的标准，边搅拌边投入第二缓冲液A，以8.75-24.31g/L的标准，投入第二缓冲液B，注意不要让水溅出,搅拌5-30分钟至物料完全溶解，溶液清澈透明配液罐底部无沉淀后，调节pH值到6.00-8.50之间，之后以5.8-20.0g/L标准投入氯化钠，待物料完全溶解后再按照上述投料方式分别以1-10g/L、5-30g/L、0.8-2.0ml/L的标准依次投入稳定剂、助悬剂和第二防腐剂，投料完成后，继续搅拌5-30分钟至全部物料完全溶解，溶液清澈透明，配液罐底部无沉淀；

烧杯中以5-20g/L的标准加入生物素于磁力搅拌器上，打开磁力搅拌器电源开关，调节搅拌子至中档转速，使溶液保持中速转动状态，以25-75ml/L的标准，边搅拌边加入羊抗人Kappa游离轻链抗体，搅拌1-4h反应，反应结束后透析去除未结合的游离抗体，以5-20g/L标准加入链霉亲和素反应1-4h，反应结束后透析去除未结合的生物素-抗体；

最后把偶联有链霉亲和素-生物素-羊抗人Kappa游离轻链抗体加入配液罐中，继续搅拌5-30分钟至溶液清澈透明，配液罐底部无沉淀。

溶解完的配液按照微孔过滤器操作规程，通过微孔滤膜过滤，过滤后的溶液存放在成品罐中，进行标识。