[发明专利]一种LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法

权利要求书

1.一种LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)配制镁铝溶液；

2)配制氢氧化钠溶液；

3)混合上述步骤1)和步骤2)中获得的镁铝溶液和氢氧化钠溶液，收集、洗涤和重悬沉淀，得到纳米颗粒乳浊液；

4)将上述步骤3)中得到的纳米颗粒乳浊液进行水浴处理，水浴处理的方法为100℃水浴4～15h；

5)将上述步骤4)中水浴处理后的纳米颗粒乳浊液进行超声波处理，制得LDH纳米颗粒；所述超声波处理方式为超声波处理3次，每次5min；

6)将上述步骤5)制得的LDH纳米颗粒与核酸分子混合偶联；

7)加入终浓度为0.1％的吐温-20，并静置。

2.根据权利要求1所述的LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述镁铝溶液由MgCl₂和AlCl₃溶于去离子水获得，所述镁铝溶液中MgCl₂和AlCl₃的浓度分别为0.029g/mL和0.024g/mL。

3.根据权利要求1所述的LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述氢氧化钠溶液由NaOH溶于去离子水获得，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.006g/mL。

4.根据权利要求1所述的LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中，按照1：4的体积比将镁铝溶液在3～10sec内加入搅拌的NaOH溶液中，然后继续搅拌30min，收集沉淀的方法为8000rpm离心10min。

5.根据权利要求1所述的水浴处理方法，其特征在于：所述水浴处理的方法为100℃水浴8h。

6.根据权利要求1所述的LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法，其特征在于：所述步骤6)中，所述LDH纳米颗粒与核酸分子按照质量比1:1～1:6进行混合偶联。

7.根据权利要求1所述的LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物的制备方法，其特征在于：所述步骤6)中，所述核酸分子为1.832-13.559kb的线状或环状核酸分子。

8.根据权利要求7所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子包含eGFP基因。

9.一种按照权利要求1～8中任意一项所述方法制备得到的LDH纳米颗粒与核酸分子偶联物在遗传转化植物细胞中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于：所述的双子叶植物为绿豆或黄瓜任一种；所述的单子叶植物为洋葱或水稻任一种。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述细胞为表皮细胞或根尖细胞。