[发明专利]一种通过函数拟合确定DNA片段临界聚乙二醇浓度的系统及方法

权利要求书

1.一种通过函数拟合确定DNA片段临界聚乙二醇浓度的系统，其特征在于：包括：控制模块(1)、PCR扩增仪(2)、容器箱(3)、涡旋震荡仪(4)、磁分离架(5)、真空泵(6)、干燥箱(7)、紫外分光光度计(8)、羧基磁颗粒(9)、离心管1(10)、离心管2(11)，所述控制模块(1)为整个系统的控制中心，与容器箱(3)、涡旋震荡仪(4)、磁分离架(5)、真空泵(6)、干燥箱(7)、紫外分光光度计(8)相连，控制其启停、运行参数以及反馈信息；所述PCR扩增仪(2)为普通扩增仪，与容器箱(3)通过管道相连，相对独立运行，不受控制模块(1)的控制；所述涡旋震荡仪(4)与控制模块(1)相连，其震荡强度和时间由控制模块(1)控制；所述磁分离架(5)与控制模块(1)相连，其运行受控制模块(1)控制；所述真空泵(6)与控制模块(1)相连，其工作负压和时间由控制模块(1)控制；所述干燥箱(7)为恒温烘箱，与控制模块(1)相连，干燥温度和时间受控制模块(1)控制；所述紫外分光光度计(8)与控制模块(1)相连，向控制模块(1)传递测定结果；所述羧基磁颗粒(9)表面的羧基含量约为110μmol/g，其水力粒径约为1μm，且表面的Zeta电位为42.0±0.5mv，装于容器箱(3)内；所述离心管1、2(10、11)为该系统的分析液承载容器，运作进程，人工将其移动到相应仪器位置。

2.根据权利要求1所述的一种通过函数拟合确定DNA片段临界聚乙二醇浓度的系统，其特征在于：所述容器箱(3)受控制模块(1)控制，其上部有两个以上隔板，将其分成不同区域，不同区域内装有羧基磁颗粒(9)、蒸馏水、准备好的DNA片段和聚乙二醇、NaCl、乙醇溶液、pH8.0的TE缓冲溶液，下部为溶液混合区，底部有溶液流出口。

3.一种通过函数拟合确定DNA片段临界聚乙二醇浓度的方法，其特征在于：所述方法包括：

(一)DNA片段准备：利用PCR扩增仪(2)，以人类全血基因组或λDNA作为扩增模板，进行PCR扩增获得DNA片段，并通过与容器箱(3)相连的管道将其装入容器箱(3)内相应区域；

(二)DNA片段回收：确保所有沉淀的DNA都能吸附到羧基磁颗粒(9)表面，同时保持足够的DNA片段量，以确保在脱附过程中能够一次性脱附下来，保持脱附也中的核酸浓度在紫外分光光度计(8)以内，利用紫外分光光度计(8)测定回收的DNA片段浓度，并将结果反馈给控制模块(1)，具体步骤如下：第一、对控制模块(1)进行设定，设定容器箱(3)内各种物质的混合比例和混合量，设定涡旋震荡仪(4)的震荡强度和时间，设定磁分离架(5)的磁分离时间，设定真空泵(6)的工作负压和时间，设定干燥箱(7)的干燥温度和时间；第二、将离心管1(10)管口与容器箱(3)底部的溶液流出口对接，容器箱(3)根据控制模块(1)的设定配制成混合溶液，并将其输入到离心管1(10)内；第三、将离心管1(10)放在磁分离架(5)上，按照控制模块(1)的设定，进行磁分离去除上清液；第四、再次将离心管1(10)与容器箱(3)底部的溶液流出口对接，此次按照控制模块(1)的设定，容器箱(3)向离心管1(10)注入乙醇，进行两次清洗，并用真空泵(6)去除乙醇，再通过干燥箱(7)恒温干燥去除残留乙醇；第五、再次将离心管1(10)与容器箱(3)底部的溶液流出口对接，在控制模块(1)的设定下，容器箱(3)向离心管1(10)加入pH8.0的TE缓冲溶液，并在涡旋震荡仪(4)充分震荡后，在干燥箱(7)内进行恒温脱附DNA；第六、将离心管1(10)放入磁分离架(5)，按照控制模块(1)的设定进行磁分离以去除磁颗粒，把脱附后的溶液移至离心管2(11)中；第七、通过紫外分光光度计(8)测定脱附溶液对260nm光线的吸收情况来测定其中的DNA浓度，并将测定结果反馈给控制模块(1)；

(三)函数拟合去顶临界聚乙二醇浓度：重复多次调整控制模块(1)设定，仅改变聚乙二醇浓度，保持其他参数不变，回收不同聚乙二醇浓度下的DNA片段，并通过紫外分光光度计(8)进行浓度测定，将结果反馈给控制模块(1)，控制模块(1)会根据反馈回的浓度绘制出回收的DNA浓度与聚乙二醇浓度的关系曲线，并进行曲线拟合，得到二者之间的函数关系式，通过该函数关系式计算得出临界聚乙二醇浓度。