[发明专利]一种葛根试管薯离体诱导方法有效
| 申请号： | 201811042118.5 | 申请日： | 2018-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN108849532B | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | 严华兵;曾文丹;尚小红;曹升;谢向誉;肖亮;陆柳英;赖大欣 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 530000 广西壮族自治区*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葛根 试管薯诱导 试管薯 离体诱导 生根苗 接种 生根培养基 生根培养 诱导培养 培养基 组培苗 诱导 培育 | ||
1.一种葛根试管薯离体诱导方法，包括以下步骤：
1)将葛根组培苗接种到生根培养基中进行生根培养，得生根苗；所述生根培养基由以下原料组成：以1/2MS培养基为基本培养基，0.02～0.05mg/L的NAA、25～36g/L的蔗糖和4～8g/L的琼脂；
所述葛根组培苗的制备方法，包括：
a)以葛根幼嫩组织为外植体，消毒后接种于初代培养基中进行初代培养，得无菌苗；所述初代培养基由以下原料组成：以MS培养基为基本培养基，0.1～0.3mg/L的6-BA、0.02～0.1mg/L的NAA、25～38g/L蔗糖和4～8g/L的琼脂；
b)将步骤a)得到的所述无菌苗接种于增殖培养基中进行增殖培养，得丛生苗；所述增殖培养基由以下原料组成：以MS培养基为基本培养基，0.01～0.05mg/L的6-BA、0.02～0.1mg/L的NAA、26～32g/L的蔗糖和4～8g/L的琼脂；
c)将步骤b)得到的所述丛生苗单芽分离后得葛根组培苗；
2)将步骤1)得到的所述生根苗接种于试管薯诱导培养基中进行诱导培养，得葛根试管薯；所述诱导培养基由以下原料组成：以MS培养基为基本培养基，1～3.5mg/L的6-BA、0.01～0.05mg/L的NAA、1～10μmol/L的JA、70～90g/L的蔗糖和4～8g/L的琼脂。
2.根据权利要求1所述离体诱导方法，其特征在于，步骤a)所述幼嫩组织包括幼嫩茎蔓。
3.根据权利要求1所述离体诱导方法，其特征在于，步骤a)所述初代培养为光照培养，所述初代培养的光照时间为11～20h/d，光照强度为1500～2000lx；所述初代培养的温度为22～28℃，所述初代培养的时间为28～35d。
4.根据权利要求1所述离体诱导方法，其特征在于，步骤b)所述增殖培养为光照培养，所述增殖培养的光照时间为11～20h/d，光照强度为1500～2000lx；所述增殖培养的温度为22～28℃，所述增殖培养的时间为25～30d。
5.根据权利要求1所述离体诱导方法，其特征在于，步骤1)所述生根培养为暗培养，所述生根培养的培养温度为22～28℃，培养时间为5～7d。
6.根据权利要求1所述离体诱导方法，其特征在于，步骤1)所述生根苗的根长为0.5～1cm。
7.根据权利要求1所述离体诱导方法，其特征在于，步骤2)所述诱导培养为光照培养，所述诱导培养的光照时间为11～20h/d，光照强度为1500～2000lx；所述诱导培养的温度为22～28℃，所述诱导培养的时间为20～25d。
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