[发明专利]一种葛根试管薯离体诱导方法

说明书

本发明提供了一种葛根试管薯离体诱导方法，涉及葛根培育技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：1)将葛根组培苗接种到生根培养基中进行生根培养，得生根苗；2)将所述生根苗接种于试管薯诱导培养基中进行诱导培养，得葛根试管薯。利用本发明方法可明显提高试管薯诱导率，缩短试管薯诱导时间，在20～25d的诱导时间内，试管薯诱导效率可高达95％以上。

技术领域

本发明属于葛根的培育技术领域，具体涉及一种葛根试管薯离体诱导方法。

背景技术

葛根又叫葛藤、葛麻藤、粉葛，为豆科葛属藤本植物，富含淀粉，是中国卫生部首批批准的药食同源两用植物，素有“北参南葛”、“亚洲人参”之美誉。葛根是以地下贮藏块根为主要经济收获器官，所以研究葛根贮藏块根发生发育具有重要意义。由于葛根块根从苗期到成熟期需要9～10个月，且块根生长在土壤中，研究观察耗时长且不方便取材。目前，有关葛根试管薯的诱导国内外未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种葛根试管薯的离体诱导方法，诱导周期短，诱导效率高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种葛根试管薯离体诱导方法，包括以下步骤：

1)将葛根组培苗接种到生根培养基中进行生根培养，得生根苗；所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，还包括：0.02～0.05mgL的NAA、25～36g/L的蔗糖和4～8g/L的琼脂；

2)将步骤1)得到的所述生根苗接种于试管薯诱导培养基中进行诱导培养，得葛根试管薯；所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：1～3.5mg/L的6-BA、0.01～0.05mg/L的NAA、1～10μmol/L的JA、70～90g/L的蔗糖和4～8g/L的琼脂。

优选的，步骤1)所述葛根组培苗的制备方法，包括：

a)以葛根幼嫩组织为外植体，消毒后接种于初代培养基中进行初代培养，得无菌苗；所述初代培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：0.1～0.3mg/L的6-BA、0.02～0.1mg/L的NAA、25～38g/L蔗糖和4～8g/L的琼脂；

b)将步骤a)得到的所述无菌苗接种于增殖培养基中进行增殖培养，得丛生苗；所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：0.01～0.05mg/L的6-BA、0.02～0.1mg/L的NAA、26～32g/L的蔗糖和4～8g/L的琼脂；

c)将步骤b)得到的所述丛生苗单芽分离后得葛根组培苗。

优选的，步骤a)所述幼嫩组织包括幼嫩茎蔓。

优选的，步骤a)所述初代培养为光照培养，所述初代培养的光照时间为11～20h/d，光照强度为1500～2000lx；所述初代培养的温度为22～28℃，所述初代培养的时间为28～35d。

优选的，步骤b)所述增殖培养为光照培养，所述增殖培养的光照时间为11～20h/d，光照强度为1500～2000lx；所述增殖培养的温度为22～28℃，所述增殖培养的时间为25～30d。

优选的，步骤1)所述生根培养为暗培养，所述生根培养的培养温度为22～28℃，培养时间为5～7d。

优选的，步骤1)所述生根苗的根长为0.5～1cm。

优选的，步骤2)所述诱导培养为光照培养，所述诱导培养的光照时间为11～20h/d，光照强度为1500～2000lx；所述诱导培养的温度为22～28℃，所述诱导培养的时间为20～25d。