[发明专利]一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型在审
| 申请号： | 201811044868.6 | 申请日： | 2018-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN109112096A | 公开（公告）日： | 2019-01-01 |
| 发明（设计）人： | 胡勤;刘苑;潘宇;林泓磊;江磊 | 申请（专利权）人： | 程辉 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人： | 赵晓芳 |
| 地址： | 350400 福建省福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 口腔黏膜 体外 三维 组织工程化 实验模型 细胞支架 建模 上室 下室 技术敏感性 细胞混合物 专用培养基 基质蛋白 建模周期 可复制性 培养材料 肉瘤细胞 上皮细胞 细胞分布 基质胶 上皮层 角化 气液 小鼠 纤维 节约 种植 资金 | ||
1.一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于，主要包括以下步骤：
步骤1：提取小鼠肉瘤细胞中的外基质蛋白做细胞支架；
步骤2：将成纤维及上皮细胞分批种植于细胞支架中；
步骤3：将步骤2中的基质胶与细胞混合物分批置于Transwell上室和下室中；
步骤4：向Transwell上室、下室分别添加上皮专用培养基和普通的DMEM培养基；
步骤5：利用气液平面形成角化上皮层，完成体外三维口腔黏膜的建模。
2.根据权利要求1所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：所述步骤4中，分别添加培养基和普通的DMEM培养基后放置在细胞培养箱中培养6-8天。
3.根据权利要求2所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：所述步骤5中，放置5-7天后形成角化上皮层。
4.根据权利要求3所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：将步骤5中形成的口腔黏膜模型用刀片从Transwell上室上切下，并使其吸附在玻片上，完整保存。
5.根据权利要求4所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：将吸附在玻片上完整保存的口腔黏膜模型依次经过脱水、浸蜡后包埋。
6.根据权利要求5所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：预先将基质胶与培养基在冰面上以体积比1:1混合形成支架材料，再与小鼠肉瘤细胞中的外基质蛋白一同形成细胞支架。
7.根据权利要求6所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：所述步骤2中的成纤维细胞密度为1.2x106/孔。
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