[发明专利]一种植物多糖及用于促进猪卵母细胞体外成熟的用途在审
申请号: | 201811051852.8 | 申请日: | 2018-09-10 |
公开(公告)号: | CN109096411A | 公开(公告)日: | 2018-12-28 |
发明(设计)人: | 叶培德 | 申请(专利权)人: | 叶培德 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;C12N5/075 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 224633 江苏省盐城*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 猪卵母细胞 种植物 猪卵 成熟 成熟作用 体外培养 体外诱导 均一性 色谱峰 峰型 对称 检测 | ||
1.一种多糖,其特征在于,通过如下方法制备得到:
S1、粗多糖的提取
将干燥的水菖蒲Acorus calamus根茎粉碎,热水沸腾提取,提取液过滤,滤液浓缩至1/5体积,以Sevag法除蛋白,离心去除中间有机相与水相交界处乳化层,合并上清液,加入无水乙醇沉淀多糖,静置,离心收集沉淀,用蒸馏水复溶、冷冻干燥得粗多糖;
S2、粗多糖的初步纯化
准确称取100mg上述麦胚粗多糖冻干粉充分溶解于10mL无菌水中,将配好的粗多糖溶液全部滴加上样至DEAE-Sepharose Fast Flow(3.6cm×20cm)纤维素阴离子交换层析柱中,依次用0,0.1mol/L的NaCl溶液分别洗脱10个柱体积,洗脱的流速为1.2mL/min,收集0.1mol/L的NaCl溶液洗脱液,冷冻干燥得到初步纯化多糖;
S3、初步纯化多糖的进一步纯化
称取0.1mol/LNaCl溶液洗脱得到的初步纯化多糖25mg,用5mL超纯水溶解,然后上样至SephacrylS-200HR凝胶柱,凝胶柱内径为2cm,柱床高度为75cm,用蒸馏水洗脱,洗脱的流速为0.4mL/min,收集第4~5个柱体积洗脱液,冷冻干燥得到纯化多糖。
2.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于:步骤S1固液比为1:5。
3.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于:步骤S1提取3次,每次2h。
4.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于:步骤S1以Sevag法除蛋白,3000r/min离心10min去除中间有机相与水相交界处乳化层。
5.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于:步骤S1加入4倍体积无水乙醇沉淀多糖。
6.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于:步骤S1加无水乙醇后于4℃静置24h。
7.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于:步骤S1加无水乙醇静置后以3000r/min离心10min收集沉淀。
8.权利要求1-7任一所述多糖用于促进猪卵母细胞体外成熟的用途。
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