[发明专利]一种桃叶卫矛的组织培养方法在审
申请号: | 201811054581.1 | 申请日: | 2018-09-11 |
公开(公告)号: | CN109042330A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 牛新月;赵泉胜;铁英;田菊;刘洋 | 申请(专利权)人: | 内蒙古和盛生态科技研究院有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人: | 韩国强 |
地址: | 010000 内蒙古自治区呼和浩特市盛乐现代服*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 桃叶 卫矛 接种 无菌外植体 组织培养 不定芽 继代 初代培养基 工厂化生产 继代培养基 生根培养基 初代培养 继代培养 灭菌处理 生根培养 生根苗 外植体 移栽苗 成活率 生根 繁殖 | ||
1.一种桃叶卫矛的组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取桃叶卫矛外植体并进行灭菌处理,得到无菌外植体;
(2)将所述无菌外植体接种于初代培养基中进行初代培养,得到不定芽;
(3)将所述不定芽接种于继代培养基中进行继代培养,得到继代苗;
(4)将所述继代苗接种于生根培养基中进行生根培养,得到生根苗。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述外植体为桃叶卫矛的半木质化嫩枝。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述初代培养基是以MS培养基为基础,并添加NAA得到,所述初代培养基中NAA的浓度为0.05mg/L,且所述初代培养基的pH值为5.8~6.2。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述初代培养为将所述无菌外植体接种于初代培养基中,在温度为25~28℃、光照强度为2200~2800Lx、光照时间为12~16h/天的条件下进行培养15~25天,直至生成不定芽。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述继代培养基是以MS培养基为基础,并添加6-BA、NAA、蔗糖和琼脂得到,所述继代培养基中6-BA的浓度为0.15mg/L,NAA的浓度为0.15mg/L,蔗糖的浓度为30g/L,琼脂的浓度为6g/L,且所述继代培养基的pH值为5.8~6.2。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述继代培养为将所述不定芽接种于继代培养基中,在温度为25~28℃、光照强度为2200~2800Lx、光照时间为12~16h/天的条件下进行培养,每隔20~25天进行一次继代培养,每次继代培养更换培养基,并对不定芽进行分化,直至得到继代苗。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述生根培养基是以1/2MS培养基为基础,并添加碳粉、IBA、蔗糖和琼脂得到,所述生根培养基中碳粉的浓度为0.1~0.5mg/L,IBA的浓度为0.1mg/L,蔗糖的浓度为20g/L,琼脂的浓度为6g/L,且所述生根培养基的pH值为5.8~6.2。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述生根培养为将所述继代苗接种于生根培养基中,在温度为25~28℃、光照强度为2200~2800Lx、光照时间为12~16h/天的条件下,培养20~30天,得到生根苗。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,在所述生根培养的前3天对所述继代苗进行暗处理。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)结束后,还包括步骤(5):将所述生根苗从生根培养基中取出并置于基质中,在自然光下培育5~10天,然后在土壤中培养30~40天得到移栽苗。
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