[发明专利]一种羊栖菜抗衰老多糖的纯化方法

说明书

本发明公开了一种羊栖菜抗衰老多糖的纯化方法，包括大孔树脂纯化、离子交换层析、透析和凝胶色谱柱纯化，大孔树脂纯化步骤用大孔树脂为D3520‑Cl，具体为：将粗多糖进行大孔树脂纯化，经收集的洗脱液的浓缩液醇沉，离心，干燥；将大孔树脂纯化后的多糖溶液进行离子交换层析纯化，将收集各洗脱峰区间的洗脱液进行透析，冷冻干燥；将透析得到的多糖粗品溶液上样至凝胶柱进一步纯化，收集各洗脱峰区域的洗脱液，选择抗老化效果最好的组分，浓缩，冷冻干燥得抗衰老多糖。有益效果为：本发明抗衰老多糖的纯化方法简单可行，多糖的提取效率、得率和纯度均较高，大孔树脂纯化步骤用大孔树脂具有较高活性的氯甲基、吸附量高。

技术领域

本发明涉及多糖提取技术领域，尤其是涉及一种羊栖菜抗衰老多糖的纯化方法。

背景技术

多糖（polysaccharide）广泛存在于动植物和微生物等有机体中，是由10个以上单糖通过糖苷键连接而成的聚合物，它是生物体内除蛋白质和核酸外又一类重要的高分子化合物。一般植物多糖由成百上千个单糖组成，由于单糖的种类和连结方式以及异头碳的构型都会影响多糖的结构，因此从自然界获得到的多糖在结构上远比蛋白质和核酸的结构要复杂很多。进入20世纪90年代后，多糖及复合物的分离纯化、组分测定和结构分析等方面的研究有了长足进步，同时由于细胞生物学和分子生物学的发展，研究发现了糖类化合物特别是糖复合物上的糖链参与了各种生命现象的调节，如细胞识别、粘连与融合、信号传达、免疫与应答、细胞转化和分化都离不开糖链的参与。由于糖复合物的种种功效，其研究也成为生命科学研究领域的新前沿。大量研究表明，多糖具有抗肿瘤、抗凝血、降血糖、抗氧化和免疫等活性，且没有细胞毒性，应用于生物体毒副作用小，因此在临床和功能食品上得到了广泛使用，相关多糖生物资源的研究和开发利用受到海内外科学家的日益关注，成为天然药物研发、生物化学等领域的研究热点。

羊栖菜系褐藻门马尾藻科马尾藻属植物，别名玉草、海草、六角菜，作为药食两用经济海藻，有“长寿菜”美称，被推崇为益寿食品。羊栖菜多糖主要包括褐藻酸、褐藻淀粉和褐藻糖胶，羊栖菜多糖是羊栖菜中含量最多的特色成分，约占其干重的45%-65%，羊栖菜多糖除作为膳食纤维调理胃肠功能、调节机体对脂类和糖类等的代谢作用外，还具有抗氧化、抗肿瘤和增强免疫等生物活性。这些作用能够直接或间接地改善人体健康状况，降低有害刺激对机体的损伤，减缓与衰老相关疾病的进程。目前，羊栖菜多糖提取技术主要有酶解法、碱解法、酸解法、水提取法、超声波辅助，但现有羊栖菜多糖的提取方法中，都存有不足，包括成本太高，操作复杂，耗能耗材较多，多糖含量和纯度不高等。最重要的是：多糖粗提取物往往是复杂的混合物，既包括分子量不同、结构不同的多糖片段，又包括蛋白质、色素等物质。因此需要对其进行分离纯化处理。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纯化方法简单可行，多糖的提取效率、得率和纯度均较高，大孔树脂纯化步骤用大孔树脂具有较高活性的氯甲基、吸附量高的羊栖菜抗衰老多糖的纯化方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

一种羊栖菜抗衰老多糖的纯化方法，包括大孔树脂纯化、离子交换层析、透析和凝胶色谱柱纯化，其中大孔树脂纯化步骤用大孔树脂为D3520-Cl。本发明用D3520-Cl在其中引入了具有较高活性的氯甲基(−CH₂Cl)，提高了非极性大孔树脂D3520的极性，使得抗衰老多糖中的色素和蛋白质易于进入D3520-Cl的内部，与其内部的活性位点产生吸附作用，从而提高其吸附量，有效提高多糖的纯度、改善多糖的感官效果。