[发明专利]一种环形泰勒虫病疫苗保护剂及制备方法

权利要求书

1.一种环形泰勒虫病疫苗保护剂，其特征在于以质量体积百分含量计算下列组分组成：食用明胶2%，亚硒酸钠0.01%，硫酸锌0.01%，青霉素工作浓度为100U/ml、链霉素工作浓度为0.1mg/ml的双抗溶液1%，缓冲体系为pH7.2-7.4的0.01M PBS和RPMI-1640。

2.权利要求1所述的环形泰勒虫病疫苗保护剂的制备方法，其特征在于用PBS缓冲液将食用明胶溶解，调整胶浓度，10磅高压灭菌15分钟后4℃保存备用，其次将亚硒酸钠和硫酸锌溶解于RPMI-1640中，用0.22um滤器过滤除菌后4℃保存备用。

3.如权利要求1或2所述的环形泰勒虫病疫苗保护剂在制备疫苗中的用途，其特征在于，先制备出食用明胶溶液和亚硒酸钠和硫酸锌溶液，再进行以下步骤：

a.细胞培养：将连续传代至第20代的环形泰勒虫裂殖体感染的牛淋巴细胞在T75细胞培养瓶中静置培养3天，使细胞生长到旺盛期，细胞密度与活力最佳时用于疫苗制备；

b.保护剂制备：将配置好的亚硒酸钠和硫酸锌溶液添加到食用明胶溶液中，使得明胶的含量在2%，亚硒酸钠含量为0.01%，硫酸锌含量为0.01%，同时添加1%双抗，充分混匀后用于疫苗的制备；

c.疫苗制备：将生长旺盛期的细胞离心，弃上清，沉淀用b配制的保护剂悬浮，调整细胞浓度至2.5×10⁶细胞/mL，使细胞均匀分散到保护剂中制备疫苗，置于4℃保藏。