[发明专利]铁蛋白化学发光检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：

R1：含有链霉亲和素包被的磁微粒的液体；

R2：含有生物素标记的铁蛋白抗体的液体；

R3：含有吖啶酯标记的铁蛋白抗体的液体；

其中，R1中磁微粒与链霉亲和素的质量比为1:10-1:20；链霉亲和素包被的磁微粒的浓度为10mg/ml；

R2中铁蛋白抗体与生物素的摩尔比为1:5-1:10；生物素标记的铁蛋白抗体的浓度为1mg/ml；

R3中铁蛋白抗体与吖啶酯的摩尔比为1:5-1:10；吖啶酯标记的铁蛋白抗体的浓度为1mg/ml。

2.根据权利要求1所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，还包括7个浓度的校准品，校准品中含有铁蛋白的浓度分别为0ng/ml，6.00～8.00ng/ml、40.00～45.00ng/ml、200.00～220.00ng/ml、430～450ng/ml、900.00～1100.00ng/ml及2000.00～2200.00ng/ml。

3.根据权利要求1所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，还包括两个浓度的质控品，其中，高浓度质控品中含有铁蛋白的浓度为290.00～310.00ng/ml，低浓度质控品中含有铁蛋白的浓度为19.00～21.00ng/ml。

4.根据权利要求2或3所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，校准品或质控品的缓冲液中含有0.1mol/L的PB、0.15mol/L的氯化钠、1％的牛血清白蛋白及0.05％的tween-20。

5.根据权利要求1所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，R1的制备方法为：取磁微粒，用20mM PB缓冲液清洗3次，然后稀释至10mg/ml，按照磁微粒与链霉亲和素质量比1:10-1:20的比例添加链霉亲和素，37℃孵育18-24h后，置于磁分离架上分离磁珠，去上清，用20mM PB缓冲液清洗3次，加入封闭液，37℃孵育18-24h后，置于磁分离架上分离磁珠，去上清，用20mM PB缓冲液清洗3次，用20mM PB缓冲液稀释至10mg/ml，2-8℃保存备用，得到含有链霉亲和素包被的磁微粒的液体试剂。

6.根据权利要求1所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，R2的制备方法为：取铁蛋白抗体，首先用20mM PB缓冲液置换铁蛋白抗体保存液，用20mM PB缓冲液稀释至1mg/ml，将生物素按照抗体与生物素摩尔比1:5-1:10进行添加，37℃孵育2-4h进行标记，然后加入封闭液，37℃孵育2-4h，最后对蛋白进行纯化，得到含有生物素标记的铁蛋白抗体的液体试剂。

7.根据权利要求1所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，R3的制备方法为：取铁蛋白抗体，首先用20mM PB缓冲液置换铁蛋白抗体保存液，用20mM PB缓冲液稀释至1mg/ml，将吖啶酯按照抗体与吖啶酯摩尔比1:5-1:10添加，37℃孵育2-4h进行标记，然后加入封闭液，37℃孵育2-4h，最后对蛋白进行纯化，得到含有吖啶酯标记的铁蛋白抗体的液体试剂。

8.根据权利要求5～7任一项所述的铁蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述封闭液为含2-5％BSA的20mM PB缓冲液。