[发明专利]一种用于诊断丙型肝炎的方法

说明书

本发明涉及分子诊断领域，具体涉及一种用于诊断丙型肝炎的方法。本发明建立了一个基于实验室检测条件和检测人群的实验室检测新策略，即ELISA作为抗‑HCV初筛实验时，当S/CO值≥5.20时直接报告抗‑HCV阳性；当S/CO值<1.88时直接报告抗‑HCV阴性；当S/CO值1.88‑5.19时，先用CMIA复检，当CMIA检测S/CO值≥8.1时直接报告抗‑HCV阳性；当S/CO值<3.35时直接报告抗‑HCV阴性；当S/CO值3.35‑8.09时，需用特异性更强的补充试验(RIBA或HCV‑RNA检测)进一步明确。本发明所提供的用于诊断丙型肝炎的方法相比于现有方法误诊率低，具有应用价值。

技术领域

本发明涉及分子诊断领域，具体涉及一种用于诊断丙型肝炎的方法。

背景技术

据WHO最新数据，2015年近175万人新感染了丙肝病毒，使全球丙型肝炎感染者总数达到7100万人，每年约有39.9万人死于丙型肝炎，主要是肝硬化和肝细胞癌。丙型肝炎起病隐匿，临床症状不典型，我国丙型肝炎大样本调查数据显示，997例初治患者中，有101例已经患有肝硬化。根据医学研究所最近的研究，有75％的慢性丙肝患者没有意识到他们受到感染，丙型肝炎被称为沉默的流行病和沉默的杀手。慢性丙肝所造成的危害日益显现，新型的抗病毒药物可以使丙肝达到治愈的状态，但前提是早期诊断。

临床将丙肝病毒实验室检测结果作为诊断的主要依据，实验室检测主要包括初筛试验和补充确认试验。初筛试验是基于抗-HCV而建立的，目前用于丙肝抗体初筛的两种最常见的方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光微粒子免疫分析(CMIA)。补充确认试验包括重组免疫印迹试验(RIBA)和检测核酸的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)。除此之外，丙肝的实验室检测还包括核心抗原检测和基因分型检测。

ELISA目前是我们国家特别是欠发达地区检测丙肝抗体的主要方法，ELISA作为丙肝抗体的初筛方法具有很高的敏感性。任何方法学来讲，敏感性的最大化通常会降低特异性，导致假阳性结果的产生。美国CDC(疾病控制与预防中心)的报告指出，在免疫功能正常的人群中以酶法作为抗体初筛试验假阳性率高达35％。不少研究都曾报道过相比于ELISA检测，CMIA检测有着更高的特异性和阳性预测值，但仍存在假阳性的情况。假阳性的结果可能会引起患者的焦虑与恐慌，造成不必要的心理负担，患者也可能因反复进行检测而造成不必要的经济负担，同时还可能会给实验室及医院带来医疗纠纷。

基于抗体初筛试验假阳性较高，且单一的检测方法对于准确诊断来讲效能有限，大量的丙型肝炎实验室检测策略被提出。2003年，美国CDC确定了三种酶法和一种化学发光分析方法的最佳临界S/CO值，并建议以此值作为判断阴阳性的依据。过去的十几年中，国外的实验室检测策略都是基于研究者所处实验室的检测条件及检测人群而建立的。我国CDC在2011年发布了《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》，规范中分别提出了关于疫情检测、临床诊断和血液筛查的实验室检测策略。在临床诊断相关的实验室检测策略上规范提出HCV抗体筛查阳性后应进行补充确认实验。同时规范首次引入了S/CO值的使用，S/CO值对于判断HCV感染是个非常有用的工具，规范提出高S/CO值不需要补充试验，低S/CO值需要补充试验进一步明确。

现有丙肝的诊断策略大多不完整，临床医生往往只进行抗体初筛而缺少进一步的补充试验，依据初筛实验的结果诊断丙肝往往存在较高的误诊率。现有的检测策略存在一些共同特点，首先每个实验室检测策略都是基于本实验室的检测条件和检测人群而建立的，可复制性及适用性不强。其次补充确认试验操作复杂，价格昂贵且对仪器和环境要求高，每个初筛阳性标本均进行补充试验可行性低，特别在基层实验室不易实现。因此，现有检测策略在实际应用中有局限性，漏诊率、误诊率过高，可行性低。综上所述，迫切需要完善现有检测策略，根据实验室检测条件和环境，建立一个适合实验室的丙型肝炎实验室检测新策略。

发明内容