[发明专利]一种嗜碱性蛋白酶及其基因工程菌的构建方法在审

专利信息
申请号: 201811069869.6 申请日: 2018-09-13
公开(公告)号: CN109022401A 公开(公告)日: 2018-12-18
发明(设计)人: 牛丹丹;谢爱连;叶秀云 申请(专利权)人: 福州大学
主分类号: C12N9/54 分类号: C12N9/54;C12N15/57;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/125;C12R1/19
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 蔡学俊;饶文君
地址: 350108 福建省福*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 碱性蛋白酶 构建 基因工程菌 地衣芽胞杆菌 重组微生物 氨基酸序 编码基因 高效生产 工业应用 基因工程 基因构建 酶工程 重组菌 基因
【权利要求书】:

1.一种嗜碱性蛋白酶,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述嗜碱性蛋白酶基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根据权利要求1所述的一种嗜碱性蛋白酶,其特征在于:所述蛋白酶是由地衣芽胞杆菌中分离获得,所述的地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)BL236,其已于2018年8月14日在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:M2018539。

4.含有权利要求1所述嗜碱性蛋白酶的基因工程菌。

5.权利要求4所述基因工程菌的构建方法,其特征在于:包括如下步骤:

1) 将嗜碱性蛋白酶基因克隆到重组表达载体;

2) 将重组表达载体转化到宿主细胞中。

6.根据权利要求5所述构建方法,其特征在于:所述重组表达质粒载体为pHY-WZX、pND-113中的任意一种。

7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述重组表达载体为pND113。

8.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于:所述的宿主细胞包括:大肠杆菌或枯草杆菌。

9. 根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于:所述细菌是大肠杆菌,包括E.coliJM109、E.coli DH5α。

10.如权利要求4所述碱性蛋白酶的基因工程菌的发酵生产方法,其特征在于:37℃,200rpm,摇瓶发酵60小时后,重组碱性蛋白酶摇瓶发酵酶活达到575U/mL。

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