[发明专利]一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法在审
申请号: | 201811071017.0 | 申请日: | 2018-09-14 |
公开(公告)号: | CN108977430A | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 郝建华;孙晶晶;王伟;刘均忠 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
主分类号: | C12N11/10 | 分类号: | C12N11/10;C12N11/02 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 环糊精葡萄糖基转移酶 海洋微生物 固定化 分子筛 交联 吸附 生物技术领域 重复使用性 催化效率 复合固定 固化条件 酶稳定性 戊二醛 包埋 硬化 | ||
1.一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:
(1)选择分子筛SBA-15作为固定化吸附载体;
(2)将酶粉溶解于缓冲液中制成酶溶液,并与固定化吸附载体SBA-15混合,振荡吸附;所述酶为海洋微生物Y112生产的环糊精葡萄糖基转移酶;
(3)将戊二醛溶液加入到步骤(2)得到的溶液中,振荡交联;
(4)将海藻酸钠溶液加入到步骤(3)得到的溶液中,用注射器逐滴滴入CaC12溶液中硬化,抽滤获取固定化酶凝胶珠,用蒸馏水多次冲洗至无CaC12残留。
2.根据权利要求1所述的一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法,其特征在于步骤(2)中酶与固定化吸附载体进行吸附的温度和转速分别为16℃、150r/min,吸附时间为6h,酶液浓度2U/mL。
3.根据权利要求1所述的一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法,其特征在于所述步骤(3)中酶与固定化吸附载体进行交联的戊二醛溶液的终浓度为0.01%,交联时间5h,交联温度和转速分别为16℃、150r/min。
4.根据权利要求1所述的一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法,其特征在于所述步骤(4)中海藻酸钠溶液的终浓度为0.04g/mL,CaC12溶液的终浓度为4%,硬化时间1h。
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