[发明专利]一种海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂

说明书

本发明涉及一种海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂，属于生物技术领域，所述保护剂包含如下组分：甘油添加量5‑10％，山梨醇添加量5‑15％，果糖添加量5‑20％，苯甲酸钠添加量1‑2％，氯化钙添加量5‑20mM，山梨酸钾添加量0.1‑1％，最稳定pH为8‑10。本发明保护剂大大提高了海洋微生物YS2071脂肪酶的稳定性，25℃下保存90天酶活保留率为91.29％，比不添加保护剂的对照样品提高70.1％，极大地提高了海洋微生物YS2071脂肪酶的稳定性，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂。

背景技术

酶的失活是限制酶制剂工业生产和应用的重要因素，因为酶的贮存稳定性及热稳定性是酶制剂能否大规模生产和商品化的关键，因此如何提高酶的储存稳定性和减少酶的失活是近年来生物化工领域研究的热点。酶的储存稳定性,对于酶的应用具有现实意义。目前，酶的稳定化的主要方法有3种，即添加保护剂、化学修饰和固定化处理。由于方法简单、成本低下和易于操作等多方面原因，添加保护剂是目前工业上提高酶稳定性的最重要手段。

脂肪酶是一类作用于甘油酰酯的重要水解酶，其基本功能是催化甘油酯水解为甘油、二酰甘油酯、单酰甘油酯和脂肪酸。此外，脂肪酶还可以催化甘油酯及水不溶性酯类的水解、酯合成、酸解、转酯化、醇解以及氨解等反应，这些反应通常具有一定的立体异构专一性和化学选择性。相比较固体酶，液体酶在提取工艺上大大节约了能源、原料，缩短了工艺、降低了成本、减少了环境污染，并且改善了工人的劳动条件。然而，液体脂肪酶在水分含量多的情况下不稳定，易失活，获得能使液体脂肪酶稳定储存的保护剂显得尤为重要。

海洋微生物因其独特的生活环境，分泌的脂肪酶可能具有特殊的性质和潜在用途。细菌YS2071是从中国黄海海水中分离得到。研究表明，YS2071分泌的脂肪酶对长链脂肪酸酯有较强的水解能力，特别是对硝基苯基月桂酸酯和三月桂酸甘油酯的分解效果较好，另外在催化乙酯型鱼油水解成脂肪酸方面和生物柴油转化中有很好的应用潜力。作为长期适应海洋低温环境的结果，该酶的热稳定性较差，在较低温度下就极易失活，这严重影响了该酶的开发应用。因此，发明YS2071分泌的脂肪酶的复合保护剂将为该酶的应用开发奠定基础。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一种海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂。

本发明是通过如下技术方案来实现的：

一种海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂，所述保护剂包含如下质量分数的组分：甘油5-10％，山梨醇5-15％，果糖5-20％，苯甲酸钠1-2％，氯化钙量5-20mM，山梨酸钾0.1-1％，最稳定pH为8-10；海洋微生物YS2071脂肪酶是由海洋微生物YS2071生产。

本发明另一个方面还提供一种海洋微生物YS2071脂肪酶酶液，是将海洋微生物YS2071脂肪酶加入到上述的保护剂中制成，海洋微生物YS2071脂肪酶在保护剂中的质量浓度为10～15mg/ml。

上述海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂的制备方法，步骤如下：按比例将甘油、山梨醇、果糖、苯甲酸钠、氯化钙、山梨酸钾加入50mM Tris-HCl、pH8.0～10.0的溶液中，搅拌均匀，在20-30℃静置1～2小时，溶质完全溶解，用50mM Tris-HCl、pH8.0～10.0溶液定容，制得海洋微生物YS2071脂肪酶稳定性保护剂；

本发明与现有技术相比的有益效果：

采用本发明提供的稳定性保护剂，大大提高了海洋微生物YS2071脂肪酶的热稳定性，在25℃下保存90天后酶活保留率为91.29％，比不添加保护剂的对照样品提高70.1％，具有广泛的应用前景。

附图说明

图1：不同浓度醇类对海洋微生物YS2071脂肪酶酶活稳定性的影响；