[发明专利]一种降低人血白蛋白制品中铝残留量的方法

权利要求书

1.一种降低人血白蛋白制品中铝残留量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(a)血浆合并融化：采用水浴融化法，得到混合血浆；

(b)混合血浆冷沉淀离心；

(c)F_I+Ⅱ+Ⅲ乙醇沉淀及过滤分离：从离心后的血浆中过滤分离得到F_I+Ⅱ+Ⅲ沉淀和F_I+Ⅱ+Ⅲ上清液；

(d)F_Ⅳ乙醇沉淀及过滤分离：从步骤(c)中所述F_I+Ⅱ+Ⅲ上清液中过滤分离得到F_Ⅳ沉淀和F_Ⅳ上清液；

(e)F_Ⅴ乙醇沉淀及过滤分离：从步骤(d)中所述F_Ⅳ上清液中过滤分离得到F_Ⅴ沉淀；

(f)精制纯化：在步骤(e)中所述F_Ⅴ沉淀中加入注射用水、乙醇和硅藻土，得到纯化过滤液；

(g)超滤透析：将步骤(f)中所述纯化过滤液pH值调至6.7～7.0，通过使用高低两种梯度浓度的NaCl溶液超滤透析；

(h)配液；

(i)巴氏灭活；

(j)分装；

(k)孵育；

步骤(g)中所述超滤透析具体为：用1mol/L NaHCO₃将步骤(f)中所述纯化过滤液pH值调至6.7～7.0，浓缩至蛋白浓度为14-16wt％，先用3wt％NaCl溶液将制品等重量透析5次，再用0.7wt％NaCl溶液将制品等重量透析4次；将蛋白液浓缩至所需浓度的1.1倍以上收集。

2.根据权利要求1所述的降低人血白蛋白制品中铝残留量的方法，其特征在于：步骤(c)中所述F_I+Ⅱ+Ⅲ乙醇沉淀及分离具体为：用0.1倍血浆体积的0.9wt％NaCl溶液稀释离心后血浆，调pH值为6.2～6.8，乙醇浓度控制在19～21wt％，最终温度控制在-5.5～-4.5℃，搅拌3h，静置3～20h后过滤，得到F_I+Ⅱ+Ⅲ沉淀和F_I+Ⅱ+Ⅲ上清液。

3.根据权利要求1所述的降低人血白蛋白制品中铝残留量的方法，其特征在于：步骤(d)中所述F_Ⅳ乙醇沉淀及过滤分离具体为：将步骤(c)中所述F_I+Ⅱ+Ⅲ上清液pH调至5.9～6.5，加入-15℃以下95wt％乙醇，至最终乙醇浓度为39～41wt％，反应液温度控制在-5.5～-4.5℃，搅拌3h，静置4～20h后过滤，得到F_Ⅳ沉淀和F_Ⅳ上清液。

4.根据权利要求1所述的降低人血白蛋白制品中铝残留量的方法，其特征在于：步骤(e)中所述F_Ⅴ乙醇沉淀及过滤分离具体为：将步骤(d)中所述F_Ⅳ上清液降温至-10～-8℃后，按0.3％(W/V)加入硅藻土，搅拌30min后过滤；将过滤后的滤液pH调至4.7～4.9，乙醇浓度最终为39～41wt％，反应液温度控制在-10～-9℃，继续搅拌3h，静置2～24h后过滤，得到F_Ⅴ沉淀，出液澄清透明。

5.根据权利要求1所述的降低人血白蛋白制品中铝残留量的方法，其特征在于：步骤(f)中所述精制纯化具体为：在纯化罐中加入不超过3.5倍所述F_Ⅴ沉淀重的注射用水，添加95wt％乙醇，至乙醇浓度不超过8.5wt％，并搅拌混匀，降温至0℃；然后将F_Ⅴ沉淀转移到纯化罐中，补加95wt％乙醇，再补加0℃注射用水至F_Ⅴ沉淀重量的5倍体积，使最终乙醇浓度为12wt％；补加硅藻土，使最终硅藻土含量不低于0.5％(W/V)；充分溶解2h以上，溶解液温度不超过3℃，pH值调至4.5～4.7，开启冷媒，将最终温度控制在-3～-2℃；继续搅拌溶解3～15h后过滤，得到纯化过滤液。