[发明专利]一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体及其制备方法在审
| 申请号： | 201811077979.7 | 申请日： | 2018-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN109055294A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 谢同;张建军 | 申请（专利权）人： | 苏州怡彼得生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00;C08F220/18;C08F230/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215002 江苏省苏州市苏州相城经*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人造细胞膜 微载体 微球 细胞培养 覆层 制备 魔芋葡甘聚糖 基质 备用 甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱 甲基丙烯酸正丁酯 偶氮二异丁腈 无水乙醇洗涤 微载体表面 旋转蒸发仪 材料覆盖 连接牢固 生产过程 细胞贴壁 乙醇溶液 可降解 石油醚 无毒性 引发剂 乙醇 粘连 烘干 稀释 洗脱 浸泡 聚合 洗涤 溶解 细胞 | ||
1.一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体，其特征在于：用于涂覆层的人造细胞膜材料为2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(MPC)与甲基丙烯酸正丁酯合成的高分子仿生新材料。
2.一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体，其特征在于：所述微载体的基质为魔芋葡甘聚糖微球，人造细胞膜覆层质量为基质微球质量的3%-5%,覆层的人造细胞膜通过真空干燥老化涂覆于基质微球表面。
3.一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，
1）将魔芋葡甘聚糖微球加入到石油醚中，搅拌洗涤，过滤后再加入到乙醇中，搅拌洗涤，过滤烘干后备用；
2）将2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(MPC)与2-5倍摩尔当量的甲基丙烯酸正丁酯溶解于乙醇中，加入引发剂偶氮二异丁腈(AIBN)，其重量为上面两个原料重量和的0.5%，后回流24小时，冷却后倒入剧烈搅拌的丙酮中沉淀，过滤去除未反应的原料和小分子杂质，真空干燥后用乙醇稀释到2%浓度备用；
3）按照人造细胞膜重量为魔芋葡甘聚糖微球重量的3-5%的比例将步骤1）洗好的魔芋葡甘聚糖微球加入到步骤2）已稀释到2%浓度的人造细胞膜乙醇溶液中，用旋转蒸发仪在35-40℃下真空干燥到流动性良好，然后在旋转蒸发仪中旋转下，打开紫外灯照射24小时后包装。
4.根据权利要求3所述的一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述甲基丙烯酸正丁酯的摩尔量为2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(MPC)的2-5倍；优选的，所述甲基丙烯酸正丁酯的摩尔量为2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(MPC)的3倍。
5.根据权利要求3所述的一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述人造细胞膜重量为魔芋葡甘聚糖微球重量的3-5%；优选的，所述人造细胞膜重量为魔芋葡甘聚糖微球重量的4%。
6.根据权利要求3所述的一种细胞培养用人造细胞膜覆层微载体的制备方法，其特征在于：步骤2）中微载体是旋转蒸发仪上旋转时，以紫外灯照射24小时消毒。
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