[发明专利]一种利用蛋白酶制备脱脂豆粕贮铁多肽的方法和应用

说明书

本发明涉及一种利用蛋白酶制备脱脂豆粕贮铁多肽的方法，步骤如下：以脱脂的大豆豆粕为原料，提取并分离铁蛋白，通过蛋白酶解技术获得分子量分布在2.0‑3.0kDa的含铁多肽组分，并进一步应用超滤技术得到具有铁成分的贮铁多肽。本方法开发了一种新型的基于多肽的补铁资源，并研究阐明了多肽结构与含铁量，为今后的补铁的产品开发提供参考。本发明方法制得的贮铁多肽及相关产品的开发在食品添加剂、饲料、保健食品等行业有着广阔的开发潜力和应用前景，同时，该方法也为豆粕资源的利用开拓了新途径。

技术领域

本发明属于食品技术领域，尤其是一种利用蛋白酶制备脱脂豆粕贮铁多肽的方法和应用。

背景技术

铁缺乏症是一类严重影响人类健康的疾病。世界卫生组织2016年统计数据表明全球有20亿人患有铁缺乏症，具体表现为精神萎靡、厌食、生长发育迟缓、经常头晕、注意力不集中、理解记忆力差等症状。目前市场上使用的补铁制剂主要是二价的非血红素铁，如无机亚铁类(FeSO₄)以及有机酸亚铁盐类(葡萄糖酸亚铁等)。然而由于这些补铁剂的铁吸收率不高，导致补铁效果不理想，甚至具有一定的副作用从而发生铁中毒症状。因此，开发天然高效的补铁产品势在必行。

大豆豆粕是大豆经过提取豆油油脂后得到的副产品。近十年，我国豆粕产量快速增长，年复合增长率为9.36％，且最近几年依然保持着10％左右的增速，2015年豆粕产量为6120万吨，约占世界豆粕产量的26.92％。1993年以来，我国豆粕供给量始终大于消费量。并且，由于豆粕具有不易保存的特点，一旦豆粕库存增加，还容易引起豆粕霉变，严重影响了其利用水平。目前，大豆豆粕的主要利用途径是牲畜和家禽的饲料原料，有少量用于制作糕点食品、健康食品及化妆品，此外还用作抗菌素原料使用。然而，其利用水平仍然较低，寻求豆粕资源的高效利用成为农业及食品行业关注的热点问题。

大豆在油脂浸出加工产出过程中主要产物为大豆豆粕和油脂，大豆组成中的大部分蛋白质组分保留在了豆粕中。研究表明，豆粕典型成分中，区别于其他食品的主要成分之一即是大豆铁蛋白。每分子大豆铁蛋白含有2500-4000个铁离子，它蕴藏着非常丰富的铁资源；并且，相对于其他补铁制剂，大豆铁蛋白具有补铁活性高、绿色、安全的特点。每分子大豆铁蛋白通常是由24个亚基组成的中空球状分子，其分子量约为560kDa，每个亚基分子量为28kDa和26.5kDa。目前，铁蛋白作为补铁制剂在应用上具有以下缺点：首先，铁蛋白较大的分子构象容易受到加工条件如高温、pH的影响，容易导致蛋白质聚合现象，溶解性及稳定性降低，影响了蛋白质稳定性及铁吸收效果；其次，铁蛋白在肠胃道内极不稳定，复杂的肠胃环境(如消化酶、低pH、食物组分)促进了蛋白质的降解，加速了铁离子的释放，影响了补铁效果。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种利用蛋白酶制备脱脂豆粕贮铁多肽的方法和应用，该方法通过酶解与分离纯化技术获得分子量更低的贮铁多肽，以使其更容易被人体吸收利用，从而提高铁的生物利用度和补铁效率，该方法制得的贮铁多肽能够应用在食品添加剂、饲料、保健食品等行业中。

本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：

一种利用蛋白酶制备脱脂豆粕贮铁多肽的方法，步骤如下：

以脱脂的大豆豆粕为原料，利用水提法提取并分离铁蛋白，通过蛋白酶解技术获得含铁多肽组分，并进一步应用分级超滤技术得到具有高铁含量的贮铁多肽。

而且，具体步骤如下：

⑴利用脱脂的大豆豆粕为原料，使用0.05-0.10M磷酸缓冲液浸泡豆粕，所述磷酸缓冲液的pH为7.0，且其含质量百分数为1％的聚乙烯吡烷酮，磷酸缓冲液：豆粕质量比为10-15:1，浸泡时间为6-8h，然后使用内切式匀浆机匀浆2-3min，得蛋白粗提液；