[发明专利]一种胚胎生产冷冻工艺

说明书

本发明涉及胚胎移植的技术领域，特别是涉及一种胚胎生产冷冻工艺，其可以提高胚胎的冷冻保存效果，并且可以提高解冻后再移植时胚胎的活性；包括以下步骤：(1)选择供体母羊和供体公羊；(2)供体公羊精液采集；(3)供体母羊超数排卵；(4)输精；(5)胚胎采集；(6)胚胎鉴定；(7)配制冷冻所需溶液；(8)冷冻前胚胎前处理；(9)胚胎装管；(10)冷冻；(11)保存。

技术领域

本发明涉及胚胎移植的技术领域，特别是涉及一种胚胎生产冷冻工艺。

背景技术

胚胎移植，又称受精卵抑制，是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植至雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，胚胎移植的本质是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程，可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力，并且大大缩短了供体本身的繁殖周期，同时增加了供体一生繁殖后代的数量。

利用胚胎移植，可以开发遗传特性优良的母畜繁殖潜力，较快的扩大良种畜群，采用胚胎移植可以使优良母畜免去了冗长的妊娠期，胚胎取出后不久即可再次发情、配种和受精，从而能在一定时间内产生较多的后代。

如果向母畜体内注射促性腺激素，还可诱发其在一个发情期中排出比自然情况下更多的卵子，取得多个胚胎供移植之用，另外，由于胚胎可以长期保存和远途运输，还为家畜基因库的建立，品种资源的引进和交换，以及减少疾病传播等提供了更好的条件。

胚胎冷冻是将胚胎和冷冻液装入冷冻管中，经过慢速和快速两组降温放置使胚胎静止下来并可在液氮中保存的一种方法，可以将剩余的质量较好的胚胎冷冻保存，待以后自然周期或人工周期解冻后植入子宫腔内，将增加受孕的机会，并且可以用于一个超排卵周期得到的胚胎数量多，质量好，不能一次全部移植的，可以将多余的胚胎冷冻保存，从而可以合理限制胚胎移植胎数，降低多胎妊娠率，并且可以为胚胎移植失败或流产母畜提供再次移植机会，同时可以在超排卵周期出现卵巢过度刺激综合征迹象时，取消胚胎移植，将胚胎进行冷冻保存，在其后非刺激周期进行冷冻胚胎移植。

肉羊胚胎移植技术的母体是“借劣种母羊之腹怀良种母羊之胎”来快速扩繁良种母羊。但是现有的胚胎在冷冻保存时效果较差，并且解冻后再移植时胚胎活性较低。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种可以提高胚胎的冷冻保存效果，并且可以提高解冻后再移植时胚胎的活性的胚胎生产冷冻工艺。

本发明的一种胚胎生产冷冻工艺，包括以下步骤：

(1)选择供体母羊和供体公羊：选择具备有优良的遗传特性和较高的育种价值，无病，健康状况良好，膘情适中，生殖系统机能正常的供体母羊和供体公羊，并且供体母羊选择2-5胎的母羊，供体公羊选择1.5-6岁的公羊；

(2)供体公羊精液采集：对选择出的供体公羊精液进行采集，并鉴定精液的质量，合格的精液按照合适的稀释比例进行稀释，以备输精使用；

(3)供体母羊超数排卵：体内刺激供体母羊使其超数排卵；

(4)输精：输精前供体母羊需空腹禁食12h，采用腹腔镜寻找到供体母羊的子宫角，采用装有精液的输精枪在两组子宫角内注入适量的精液；

(5)胚胎采集：在受精后2-3天时或5-6天时，利用冲卵液进行冲胚，从超排供体母羊体内将胚胎冲出，并收集在器皿中；

(6)胚胎鉴定：胚胎收集后，立即镜检鉴定胚胎质量，并对胚胎进行胚胎等级鉴定，根据胚胎质量与品种档案进行分组保存；

(7)配制冷冻所需溶液：配制冷冻胚胎所需要的预处理液和冷冻溶液；

(8)冷冻前胚胎前处理：将质量良好的胚胎依次放入预处理液和冷冻液中分别平衡5min；