[发明专利]一种利用褐藻寡糖提高动物精液品质的方法

权利要求书

1.一种非治疗目的的利用褐藻寡糖提高动物精液品质的方法，其特征在于，雄性哺乳动物断奶后每日通过灌胃或添加到饲料中的方式补充褐藻寡糖，

所述雄性哺乳动物为小鼠，从21日龄开始补充褐藻寡糖，所述褐藻寡糖通过灌胃方式进行补充，每日摄入量为10mg/kg体重；

所述雄性哺乳动物为猪，从35日龄开始补充褐藻寡糖，所述褐藻寡糖通过每天添加到饲料中的方式进行补充，每日摄入量为30mg/kg饲料；

所述雄性哺乳动物为绵羊，从60日龄开始补充褐藻寡糖，所述褐藻寡糖通过每天添加到饲料中的方式进行补充，每日摄入量为15mg/kg饲料；

所述褐藻寡糖的制备步骤如下：

1）制备褐藻胶：将海带清洗后称重，以料液比100g/L加水，用匀浆机均匀破碎，然后加入碳酸钠，使碳酸钠在上述海带破碎液中的浓度为4%,在93°C恒温降解4h得到褐藻胶；

2）在步骤1）所得褐藻胶中加入1×磷酸缓冲液，加热到45°C溶解褐藻胶，配置成0.3%w/v的底物，然后调节pH到7.35，加入特异的褐藻寡糖降解酶0.45IU/mL，充分混匀，然后于37°C条件下酶解4h；

3）将步骤2）所得酶解液加热到沸腾7min使酶灭活，用Sevage方法反复去除溶液中的蛋白质，随后11000r/min离心10min，丢弃沉淀，回收上清液，利用旋转蒸发仪浓缩上清液到蒸发掉上清液的80%；

4）将步骤3）所得浓缩液用100%酒精沉淀，得到的沉淀冷冻干燥，然后将冷冻干燥得到的粉末再次溶解于超纯水中，通过凝胶柱进行纯化，将纯化后的液体再次冷冻干燥得到褐藻寡糖粉末；

5）将步骤4）所得褐藻寡糖粉末进行检测，褐藻寡糖含量≥95%的为合格品，置于4°C保存备用。