[发明专利]一种利用褐藻寡糖提高动物精液品质的方法

说明书

本发明涉及一种利用褐藻寡糖提高动物精液品质的方法，给雄性哺乳动物断奶后每日通过灌胃或添加到饲料中的方式补充褐藻寡糖，小型雄性哺乳动物摄入剂量为0.01‑20mg/kg体重，中型雄性哺乳动物摄入剂量为0.05‑50mg/kg饲料，所述褐藻寡糖是经过酶解提取后进一步纯化获得的冷冻干燥的粉末。本发明首次提出利用酶解提取褐藻寡糖经过进一步纯化后，给雄性哺乳动物补饲可以显著地提高动物的精液品质，补饲时机为雄性哺乳动物断奶后即开始，本发明的技术方案使雄性哺乳动物能更好的建立生殖系统，充分挖掘公畜的遗传潜力，扩展褐藻寡糖的利用范围。

技术领域

本发明涉及动物生殖生理与繁殖技术领域，具体涉及一种利用褐藻寡糖提高动物精液品质的方法。

背景技术

近年来，由于农药化肥的超量或不正确应用、环境污染、气候变化等原因导致雄性动物精子活力下降、精子浓度降低、精子畸形率升高，从而导致雄性不孕不育率大幅度提高，这是一个世界性的问题，引起了全世界的广泛重视。然而现在还没有良好的方法来改善精液品质从而来治疗雄性不孕不育。因此，科学家们都在寻找有效的药物或方法来提高雄性动物的精液品质。

褐藻寡糖是褐藻胶的寡聚物,是一种功能性寡糖。褐藻寡糖由β-D甘露糖醛酸(ManA)和其C-5差向异构体α-L古洛糖醛酸(GulA)通过1-4糖苷键连接而成。褐藻寡糖分子量低,不仅水溶性强,稳定性高,而且具有很多生物活性,如抗肿瘤、抗氧化、抑菌、促生长等,在药物研制、功能食品开发、绿色农业等领域具有广阔的开发前景。然而褐藻寡糖是否也具有改善精液品质的功效还未知，也没有任何文献公开关于利用褐藻寡糖来改善精液品质的方法。

发明内容

为解决上述问题，本发明提出一种利用褐藻寡糖提高动物精液品质的的方法，目的在于提供一种利用天然成分的褐藻寡糖，安全有效地提高动物精液品质的方法。

本发明的利用褐藻寡糖提高动物精液品质的方法，关键在于，雄性哺乳动物断奶后每日通过灌胃或添加到饲料中的方式补充褐藻寡糖，小型雄性哺乳动物摄入剂量为0.01-20mg/kg体重，中型雄性哺乳动物摄入剂量为0.05-50mg/kg饲料。

进一步，所述褐藻寡糖的制备步骤如下：

1)制备褐藻胶：将海带清洗后称重，以料液比100g/L加水，用匀浆机均匀破碎，然后加入碳酸钠(浓度为4％w/v),在93℃恒温降解4h得到褐藻胶；

2)在步骤1)所得褐藻胶中加入1×磷酸缓冲液，加热到45℃溶解褐藻胶，配置成0.3％w/v的底物，然后调节pH到7.35，加入特异的褐藻寡糖降解酶0.45IU/mL，充分混匀，然后于37℃条件下酶解4h；

3)将步骤2)所得酶解液加热到沸腾7min使酶灭活，用Sevage方法反复去除溶液中的蛋白质，随后11000r/min离心10min，丢弃沉淀，回收上清液，利用旋转蒸发仪浓缩上清液到蒸发掉上清液的80％；

4)将步骤3)所得浓缩液用100％酒精沉淀，得到的沉淀冷冻干燥，然后将冷冻干燥得到的粉末再次溶解于超纯水中，通过凝胶柱进行纯化，将纯化后的液体再次冷冻干燥得到褐藻寡糖粉末；

5)将步骤4)所得褐藻寡糖粉末进行检测，褐藻寡糖含量≥95％的为合格品，置于4℃保存备用。

进一步，所述小型雄性哺乳动物为小鼠时，从21日龄开始补充褐藻寡糖，所述褐藻寡糖通过灌胃方式进行补充。

进一步，所述雄性哺乳动物为猪时，从35日龄开始补充褐藻寡糖，所述褐藻寡糖通过每天添加到饲料中的方式进行补充。

进一步，所述雄性哺乳动物为绵羊时，从60日龄开始补充褐藻寡糖，所述褐藻寡糖通过每天添加到饲料中的方式进行补充。

优选地，所述小型雄性哺乳动物为小鼠时，所述褐藻寡糖每日摄入量为10mg/kg体重。