[发明专利]NADH依赖性的氨基酸脱氢酶及其在提高赖氨酸产量中的应用在审
| 申请号： | 201811089319.0 | 申请日： | 2018-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN109182283A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 陈振;刘德华 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N9/06;C12N15/53;C12N15/63;C12P13/08;C12P13/00;A23K20/189;A23K10/18 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 100084 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 氨基酸脱氢酶 赖氨酸 二氢吡啶二羧酸还原酶 二氨基庚二酸脱氢酶 天冬氨酸半醛脱氢酶 氨基酸序列 合成赖氨酸 天冬氨酸 辅因子 脱氢酶 二胺 应用 细胞 | ||
1.NADH依赖性的氨基酸脱氢酶，所述氨基酸脱氢酶为：
来源于Pseudomonas aeruginos的天冬氨酸脱氢酶；
来源于Tistrella mobilis的天冬氨酸半醛脱氢酶；
来源于Mycobacterium tuberculosis的二氢吡啶二羧酸还原酶；和/或
来源于Tepidanaerobacter acetatoxydans的二氨基庚二酸脱氢酶；
其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、3、5、7所示或如SEQ ID No.1、3、5、7所示氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸而不影响其生物活性的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述NADH依赖性的氨基酸脱氢酶的基因，其特征在于，其核苷酸序列分别含有如SEQ ID NO.2、4、6、8所示的核苷酸序列或SEQ ID No.2、4、6、8所示核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个碱基的具有90％以上同源性的、编码相同功能氨基酸脱氢酶的核苷酸序列。
3.含有权利要求2所述基因的生物材料，其特征在于，所述生物材料为载体、重组菌、细胞系或表达盒。
4.如权利要求3所述的生物材料，其特征在于，所述重组菌为可以发酵生产赖氨酸或戊二胺的菌株中含有或过表达权利要求1所述的NADH依赖性的氨基酸脱氢酶。
5.如权利要求4所述的生物材料，其特征在于，所述重组菌为可以发酵生产赖氨酸或戊二胺的菌株中含有或过表达来源于Pseudomonas aeruginos的天冬氨酸脱氢酶和来源于Tistrella mobilis的天冬氨酸半醛脱氢酶；或
含有或过表达来源于Pseudomonas aeruginos的天冬氨酸脱氢酶、来源于Tistrellamobilis的天冬氨酸半醛脱氢酶和来源于Mycobacterium tuberculosis的二氢吡啶二羧酸还原酶；或
含有或过表达来源于Pseudomonas aeruginos的天冬氨酸脱氢酶、来源于Tistrellamobilis的天冬氨酸半醛脱氢酶、来源于Mycobacterium tuberculosis的二氢吡啶二羧酸还原酶和来源于Tepidanaerobacter acetatoxydans的二氨基庚二酸脱氢酶。
6.如权利要求3-5任一所述的生物材料，其特征在于，所述重组菌为可以发酵生产赖氨酸或戊二胺的菌株中NADPH-依赖性的氨基酸脱氢酶被权利要求1所述的NADH依赖性的氨基酸脱氢酶所替代。
7.权利要求1所述的NADH依赖性的氨基酸脱氢酶或其编码基因或权利要求3-6任一所述的生物材料在制备赖氨酸或戊二胺中的应用。
8.权利要求1所述的NADH依赖性的氨基酸脱氢酶或其编码基因或权利要求3-6任一所述的生物材料在提高赖氨酸产量或提高戊二胺产量中的应用。
9.如权利要求7或8所述的应用，其特征在于，发酵生产戊二胺时，发酵菌株中内源的lysE基因被大肠杆菌的赖氨酸脱羧酶基因cadA所替换。
10.权利要求1所述的NADH依赖性的氨基酸脱氢酶或其编码基因或权利要求3-6任一所述的生物材料在制备药物或饲料添加剂中的应用。
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